划痕愈合实验（细胞水平）.pdfVIP

解螺旋 陪伴医生科研成长 划痕愈合实验 1．实验原理 当细胞长到融合成单层状态时，在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域，称为“划 痕”。划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”愈合。 基本的步骤包括“划痕”的制 造，细胞迁移期间图像的获得以及后期数据的处理。 2．实验目的 检测贴壁生长肿瘤细胞的侵袭转移能力。解螺旋/ 3．实验材料 3.1. 主要试剂 试剂/材料名称 来源 Cat.No. 血清 BI 04-001-1A 双抗 Hyclone SV30010 胰蛋白酶 Hyclone SH30042 Culture Insert Ibidi Eubio80206 （举例） 3.2 主要仪器 仪器名称 来源 型号 生物安全柜 苏净安泰 BSC-B000IIA2 二氧化碳培养箱 Thermo 311 离心机 上海卢湘仪公司 TP25-ws 显微镜 Olympus CKX41 3.3 试剂配制 3.3.1 完全培养基配制 于基础培养基中，加入10%FBS,1%双抗，以及其他培养成分（个别细胞需要额外的营养 因子），轻轻混匀，4℃冰箱储存。 1 解螺旋 陪伴医生科研成长 3.3.2 无血清培养基配制 于基础培养基中，加入 1%双抗，以及其他培养成分（个别细胞需要额外的营养因子）， 轻轻混匀，4℃冰箱储存。解螺旋/ 3.3.3 D-Hanks 配制 成分 终浓度 NaCl 8 g/L KCl 0.4 g/L Na2HPO4·7H2O 0.1 g/L KH2PO4 0.06 g/L NaHCO3 0.35 g/L Glucose 1 g/L Phenol red 1ml 调pH 至7.4。 3.3.4 0.25%胰蛋白酶配制 0.25% Trypsin-0.02% EDTA 0.25% Trypsin 1:250 Trypsin powder 0.25 g 1:250 Trypsin powder 0.25 g EDTA 0.02 g D-Hanks solution 80 mL D-Hank’s solution 80 mL Adju