白细胞介素-2研究进展.docxVIP

白细胞介素 -2 的研究 摘 要：综述白细胞介素 -2 及其主要临床应用、检测方法和基因工程研究方法。 白细胞介素 -2 是一种在机体的免疫调节中发挥着重要而复杂作用的细胞因子， 既可促进淋巴细胞增殖，增强免疫功能，又能限制 T 细胞反应而增强机体的免 疫耐受，故可用于治疗肿瘤和感染性疾病及自身免疫性疾病。 关键词： 白细胞介素 -2；生物活性；临床应用；检测方法 引言 1966 年，一些科学工作者发现，淋巴细胞在体外被激活后能释放出许多具 有生物学活性的成分， 它的化学组成是非免疫球蛋白的糖蛋白分子。 这些分子能 抑制巨噬细胞的迁移、调节白细胞的生长和功能。 1969 年首先由 Dumonde 把这 些淋巴细胞产生的活性成分称为“ 淋巴因子” (Lym-phokines)。除淋巴细胞外， 巨噬细胞、成纤维细胞、角质细胞和各种转化细胞均可产生淋巴因子。 1976 年 Morgan 等首先报道，用丝裂原 (植物血凝素 (PHA) 、刀豆蛋白 A(ConA)等 )刺激的淋巴细胞条件培养液 (PHA-LyCM) 可刺激 T 淋巴细胞在体外培养中长期生长。据此，他们认为 PHA-LyCM 中存在一种能刺激 T 细胞生长的因子，并 将其命名为“ T 细胞生长因子 (TCGF)”。随着研究的深入，人们发现 PHA-LyCM 不仅能刺激 T 细胞生长，还有多种其它生物活性，并依据不同的生物活性予以 命名。例如：胸腺细胞刺激因子及细胞分裂因子 (TSF，TMF) ，杀伤辅助因子 (KHF) 及协同刺激因子 (Co-Stimulator)等，其实这些都是同一种淋巴因子所表现出的不同生物活性。为避免名称混乱， 1979 年召开的第二届国际淋巴因子研讨会决定 将这种“ 淋巴因子” 命名为白细胞介素 -2，即 IL-2 。1983 年日本学者克隆了 IL-2 的基因，并成功表达。 1992 年美国 FDA 首先批准 rhIL-2 应用于临床。自从 IL-2发现以后，人工培养和繁殖淋巴细胞成为现实， 为免疫学领域的研究奠定了很好的基础。 1 IL-2 及其受体蛋白 1.1 IL-2 蛋白的结构 天然 hIL-2 在体内主要由活化的 I 型辅助淋巴细胞 (T Hl 细胞 )分泌，为分子量 约为 15.5kDa 的糖蛋白， pI 在 6.6~8.2。成熟的 IL-2 分子由 153 个氨基酸肽链 N 端剪掉 20 个氨基酸残基的信号肽后剩下的 133 个氨基酸残基组成，它与其它的 细胞因子在序列上无同源性。 翻译后加工的过程还包括第三位 Thr 位点的糖基化 和二硫键的形成。蛋白链中有三个半胱氨酸残基 (Cys)，位于第 58、105 和 125 位。58 位和 105 位半胱氨酸残基结合形成二硫键， 使肽链折叠， 125 位半胱氨酸 残基游离。研究者发现将 125 位游离的半胱氨酸残基突变为丝氨酸或丙氨酸时， 仍具有生物活性，且不会与第 58 位半胱氨酸残基形成错误二硫键，增加了 IL-2 的稳定性，同时也消除了由第 125 半胱氨酸残基造成的二聚体，但是这样新型 IL-2 容易产生抗体，这是一大不足之处 [1] 。IL-2 肽链折叠后才呈现活性，直链是 无活性的，正确的二硫键对于 IL-2 活性的保持是必需的，但糖基化却与活性无 关 [2] 。 IL-2 的二级结构有 4 个 α 螺旋区和一对 β 反平行折叠，各螺旋相互折叠使 IL 形成球状蛋白分子。磁共振 (NMR) 确定 IL-2 的四个 α螺旋，分别为 A 、1l-29．B、53-73， C、81-97，D、 116-131[3] 。对 IL-2 的 α 螺旋结构研究结果说明 α 螺旋的 破坏对其生物活性必定有影响。另外， IL-2 与其受体结合需要酸性基团 (Asp)， 而较长的疏水侧链基团则妨碍这种结合， 使其活性降低， 甚至完全丧失。 在生物 学活性上， IL-2 的氨基端和羧基端对于其结构和活性都起到关键作用 [4] 1.2 白细胞介素 -2 受体（ IL-2R ）结构 IL-2 通过与细胞膜上的 IL-2 受体 (IL-2R) 结合来发挥其生物活性。 IL-2R 受体是一个复合体，由 α 链(55kd)，β 链 (75kd)和 γ 链(64kd)组成， 3 条链都有相似长 度的外部控制区和不同的血浆控制区。 β 链的内部控制区最大 (286 个氨基酸残 基 )，而 α 链的最小 (13 个氨基酸残基 )。Α 链不具备信号传递功能， β 和 γ 都属 于 I 型细胞因子受体超家族，它们同时负责信号传递功能。只有在 3 条链同时存 在时， IL-2 才能与 IL-2R