基因工程期末复习整理.pdf

下载可编辑 动物基因工程 名词解释 ： 1 、体细胞克隆 ： 以体细胞 (包括动物成体体细胞 、胎儿成纤维细胞等 ) 为受体 ，将目的基 因以 DNA 转染的方式导入能进行传代培养的动物体细胞 ， 再以这些体细胞为核供体 ，进 行动物克隆 。 2 、显微注射 ：： 在显微操作仪下 ，将 DNA 用微吸管注射到处于原核时期受精卵的原核 中， 外源基因在受精卵繁殖过程中通过 DNA 复制而整合到基因组 ，然后将转化后的胚胎移 植到受体子宫中继续发育 ，得到转基因动物 。 3 、ES 细胞 ： 4 、基因打靶 ：是指外源 DNA 通过与受体细胞染色体 DNA 上的同源序列之间发生重组 , 整 合到预定位点 , 从而改变细胞遗传特性的方法 。 5 、基因敲除 ：将一个结构已知但功能不祥的基因去除 ，从 DNA 水平上设计实验 ，彻底破 坏该基因的功能或消除表达机制 ， 从而推测该基因的生物学功能 。 6 、乳腺生物反应器 ：通过转基因技术将外源基因在动物乳腺中高效表达 ，在乳汁中生产目 的产品 。 问题 ： 1、 常用动物转基因的方法有哪些 ？比较优缺点 显微注射法 、 逆转录病毒法 、胚胎干细胞法 、基因打靶法 、精子载体法体 、细胞核移 植法 、磷酸钙共沉淀法 。其中 ， 常用动物转基因的方法有显微注射法 、逆转录病毒法 、 胚 胎干细胞介导法 。 （1）显微注射法的优点 ：操作技术性很强 显微注射法的缺点 ：设备昂贵 ，胚胎死亡率高 .专业 .整理 . 下载可编辑 （2 ）逆转录病毒法的优点 ：操作简便 ，可大量感染细胞 ，形成单拷贝 ，转化率高 逆转录病毒法的缺点 ：没有包装蛋白 ，不能形成完整的病毒颗粒 2 、谈谈如何获得转基因小鼠 ？ 显微注射法 ：书 118 页 逆转录病毒法 ：书 123 页 胚胎干细胞法 ：书 123 页 书 138-143 页 ） 3 、转基因动物有哪些重要的应用 ？ （ （1 ）研究基因的结构与功能 ， 了解动物生命现象的内在本质 （2 ）建立多种疾病的动物模型 ，研究发病机理及治疗方法 （3 ）改善动物生产性能 ，提高动物育种效率 （4 ）作为医用或食用蛋白的生物反应器 ，可以通过家畜乳腺分泌大量安全 、高效 、 廉 价的人体药用蛋白 。 4 、 比较在细菌 、真核细胞和动物个体中表达外源基因的优缺点 ？ 动物 ： 优点 ： 目的基因在哺乳动物细胞中表达的蛋白与天然蛋白的结构 、糖基化类型和方式几乎 相同且能正确组装成多亚基蛋白 ， 哺乳动物细胞能以悬浮培养或在无血清的培养基中达到 高密度且培养体积能达到 1000L 以上 缺点 ： A 、哺乳动物细胞的表达水平低 B、高表达细胞株构建复杂 C、 细胞大规模培养 工艺复杂 D 、哺乳动物细胞生产的蛋白质类药物的成本较高 .专业 .整理 . 下载可编辑 第三章 基因工程常规技术 一 、 名词解释 1．klenow fragment ：DNA 聚合酶被枯草杆菌蛋白酶水解后产生的大片段