熟读细胞工程的基础知识(修订).docxVIP

②作物新品种的培育：单细胞融合的原 理细胞融合的方法诱导手段用法植物体细胞杂 交细胞膜的流动 性去除细胞壁后诱导 原生质体融合离心、电刺激、振动， 聚乙二醇等试剂诱导克服了远缘杂交 的不亲和性，获得 杂种植株动物细胞融合 ②作物新品种的培育：单 细胞融合的原 理 细胞融合的方法 诱导手段 用法 植物体细胞杂 交 细胞膜的流动 性 去除细胞壁后诱导 原生质体融合 离心、电刺激、振动， 聚乙二醇等试剂诱导 克服了远缘杂交 的不亲和性，获得 杂种植株 动物细胞融合 细胞膜的流动 性 使细胞分散后诱导 细胞融合 除应用植物细胞杂交 手段外，再加灭活的 病毒诱导 制备单克隆抗体 的技术之一 质叫豔2虫涎细胞脱分?倉■曲H织再如J杂种植株 aim 禺R1拾 1 曲鱗绛 1 纯度低、特异性差。 既能大量繁殖，又能产生专一的抗体。 特异性强，纯度高、灵敏度高，并能大量制备、容易标准化生产。 准确识别各种抗原物质的细微差异， 并跟一定抗原发生特异性结合，具有准确、 的优点。 生物导弹”，也有少量用于治疗其它 熟读细胞工程的基础知识 2013.3.5 （一） 细胞工程概述 细胞工程是指以 为基本单位，在体外无菌条件下进行 、 或利用 、 等 技术，使细胞某些生物学特性按照人们的意愿发生改变，从而改变生物品种市造新品种和 繁育生物个体，以及获得某些有用的 的技术。（1）细胞工程的发展（见 P39页） （2） 细胞工程的基本技术（P40-41页）：植物细胞与组织培养；细胞融合；细胞核移植；染色体 工程。 （3） 细胞工程的应用： 快速培养花卉及濒危植物 ；获得无病毒作物；开发洁净能源减少环境污染 繁殖优良家畜品种及濒危动物； （4）细胞工程与其他工程的关系（见 P43）； 植物组织培养就是在 和人工控制条件下， 将—的植物器官、组织或 ，培养在人工 配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。 （二） 植物细胞工程 理论基础（原理）：细胞全能性 全能性表达的难易程度：受精卵〉生殖细胞〉体细胞；植物细胞〉动物细胞 ★植物组织培养技术％ ■■- ■ ■-胚状体一-制备人工种子 （1） 过程：离体的植物器官、组织或细胞一T愈伤组织 一- 芽、根等器官 一T 试管苗一 t完整植株（愈伤组织 特点：排列疏松而无规则，高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞） （2） 用途：①植物繁殖新途径： 微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子； 倍体育种、突变体的利用、培养转基因植物；③细胞产物的工厂化 生产。【微型繁殖的优点：取材少、培养周期短，繁殖率高 】 （3） 地位：是培育转基因植物、植物体细胞杂交培育植物新品种的 最后一道工序。 ★植物细胞培养：（见47-48页）概念（47页）；目的：通过大规模 的细胞培养以获得人类所需要的细胞次级代谢产物；主要过程（ 48 页第二段）、应用：生产具有生物活性的次级代谢产物。 （药用原料、 食品添加剂、饲料和保健食品等）优点： 快速、高效，不受季节、 外部环境等条件的限制。 ★植物体细胞杂交技术（1）过程： 植物细胞甲一盍豎-原生囲悴甲、融直一 植物细胞乙-些辱-原隹囲悴乙I … （2） 诱导融合的方法： 物理法包括离心、振动、电刺激等。 化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作 为诱导剂。 （3） 意义：①克服了远缘杂交不亲和的障碍。②拓展了用于杂交的亲本组合范围。 （三）动物细胞工程 1.动物细胞培养（1）概念：，动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组 织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。 （2）动物细胞培养的 流程：取动物组织块（动物的早期胚胎或幼龄动物的器官或组织 剪碎t 用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞t制成 细胞悬液t转入培养瓶 中进行原代培养（一 般传至10代就不易传下去，极少数存活称为细胞株）T贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋 白酶处理分散成单个细 胞继续传代培养（细胞株传至 40-50代，增殖缓慢或停止，部分细胞的遗 传物质发生改变，具有癌变的特点，能无限增殖称为细胞系）成细胞株或细胞系 。 （3 ）细胞贴壁和接触抑制： 悬液中分散的细胞很快就 贴附在瓶壁上，称为 细胞贴壁。细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生 长到表面相互抑制时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的 接触抑制。 （4）动物细胞培养需要满足以下条件： 无菌、无毒的环境： 培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中 添加一定量的抗生素，以防 培养过程中的 污染。此外，应 定期更换 培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。 充足营养供应： 合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加 入血清、血浆 等天然成分。 适宜的温度和 pH :适宜温度