糜子溶磷、固氮内生菌的筛选及应用效应分析.pdfVIP

摘要 摘要 从产自宁夏、甘肃不同品种的糜子种子内分离、筛选出具有高效溶磷、固氮能力 的内生菌菌株，并在糜子中接种评价其溶磷、固氮、促生效果。同时通过盆栽试验测 定其对糜子苗期生长、光合及磷氮吸收累积的作用，并且进一步通过大田试验验证菌 株在自然条件下对糜子生长、产量及水分利用率效率的影响。主要结果如下： （1）从糜子种子内分离的内生真菌菌株中有5株具有溶磷能力，2株来自甘肃LM1 （Talaromyces sp.黄丝曲霉属）、LM2（Talaromyces sp.），3株来自宁夏GM1（Talaromyces sp. GM2 Penicillium sp. GM3 Penicillium chrysogenum ）、 （ 青霉属）、 （ 产黄青霉）。采用 溶磷圈和钼锑抗比色法测定其溶磷能力，发现GM1，GM3 号菌株溶磷圈直径与菌落直 径的比值D/d 最大，分别达到了1.59，1.47；相同成分液体培养基中可溶性磷含量分别 264.75 323.48μg/mL 5.26% 6.43% p 为 和 ，溶磷率分别达到 和 ，显著高于其他菌株 （＜ 0.05）；其pH 值分别为2.88和3.63，显著低于其他菌株 （p＜0.05），5个溶磷真菌的溶 磷率与pH 呈极显著 （p＜0.01）负相关。盆栽试验中，当磷用量减少75%和50%并接 GM3 SPAD ( ) 20.63 21.46 种溶磷菌 时，糜子 值 叶绿素相对含量的一个参数 分别为 和 ， -2 -1 净光合速率分别达为23.2 和25.87 μmolm s ，植株全磷含量分别为10.09和12.39mg/ 盆，均显著高于对照 （CK）（p＜0.05）。表明接种GM3对糜子促生作用表现明显，并 40mg/kg GM3 Penicilliumchrysogenum 且可以有效减磷 。 （ 产黄青霉）为本试验得到的 目标菌株且表现出良好的溶磷促生作用。 （2）通过无氮培养基以及扩增nifH 基因（固氮酶基因）来对糜子种子内的固氮细 PCR nifH 1% 菌进行筛选。研究表明， 扩增 基因反应结束后，在 琼脂糖凝胶上进行电 泳，紫外凝胶成像仪下能产生明显条带的有3株。其中，2 株来自宁夏BGM1 （Delftia sp.戴尔福特菌属）、BGM2 （Paenibacillus illinoisensis.伊利诺伊类芽孢杆菌），1株来自 BLM3 Enterobacter sp. 75% 50% 甘肃 （ 肠杆菌属）。盆栽试验中，当缺氮、氮用量减少 和 并接种固氮菌BGM2 时，糜子SPAD 值分别为22.82、24.73、25.77，净光合速率分别 -2 -1 为15.59、17.89、22.94 μmolm s ，植株全氮含量分别为0.10、0.13及0.14 g/盆，均 CK p 0.05 BGM2 显著高于对照 （ ）（＜ ）。表明接种 促生作用表现明显,并且可以有效减 氮78.7mg/kg。BGM2 （Paenibacillus illinoisensis.伊利诺伊类芽孢杆菌）为本试验得到 的目标菌株且表现出良好