医学检验-粪便标本处理.pdfVIP

粪便标本 粪便标本中常见的病原菌: 革兰氏阳性菌 革兰氏阴性菌 金黄色葡萄球菌 伤寒及其他沙门氏菌 厌氧链球菌种 志贺菌属 结核分枝杆菌 致病大肠埃希氏菌 产气荚膜杆菌 弧菌属菌种 艰辨梭菌 气单胞菌种 白色念珠菌 邻单胞菌 小肠结肠炎耶尔森菌 弯曲菌 沙 -志贺氏菌:接种 HE 及麦康凯平板,35℃、18～24 小时后检查平板,有疑似菌落,接种双糖,细菌分纯后用细菌鉴定仪上 板鉴定后与沙门、志贺氏菌因子血清凝集, 以确诊. 霍乱弧菌培养:取疑似患者粪便接种于碱性蛋白胨水中,进行增菌,同时划线接种于碱性琼脂平板/双洗平板血琼脂平板,孵 育.增菌培养孵育 6 小时后,取菌膜移种于上述平板,进行分离培养,并同时做涂片,行革兰染色和悬滴标本,检查形态和活动力.各 种分离平板在孵育 18-24 小时。观察菌落,挑取可疑菌落,先与生理盐水混匀,观察有无自凝现象.再用 O1 群霍乱多价血清作玻 片凝集试验. 如发现霍乱病人,立即向当地防疫部门提供及时准确的信息. 致病大肠埃希氏菌培养:引起腹泻的大肠杆菌有四种--ETEC、EPEC 、EIEC 、EHEC.取液体状、脓血或糊状粪便或肛拭子 划线接种于麦康凯或伊红美兰及血琼脂平板上,35℃孵育 18-24 小时,挑选乳糖发酵菌落 5 个,移种于 KIA 和 MIU 孵育过夜,并 同时进行细菌分纯，用细菌鉴定仪上板鉴定并进行血清学分型. 副溶血弧菌培养:取粪便接种于副溶血弧菌增菌液中,6-8 小时后接种于 TCBS 和 SS 琼脂平板上,35℃孵育 18-24 小时后, 观察菌落,挑取 TCBS 上绿色微隆、浑浊、湿润菌落,SS 上挑取无色透明、不易挑起菌落进行分纯后用细菌鉴定仪上板鉴定. 真菌培养:真菌性腹泻多继发于抗生素治疗后,常见于白色念珠菌、球拟酵母菌.将标本接种于含氯霉素的沙保氏琼脂及血 琼脂平板,置 25-30 ℃孵育24-48 小时,根据菌落形态及涂片革兰氏染色所见结果,决定鉴定方法. 菌群失调及菌交替症:根据临床提示粪便培养需选用数种培养基,包括强选择性和弱选择性肠道培养基、需氧及厌氧血琼 脂平板、沙保氏琼脂等,按各类细菌分别进行培养鉴定,并观察其数量变化. 3、操作流程(沙 -志贺氏菌属检查) 粪便或肛拭子 ↓ ↓ 分离培养 增菌培养 HE 及麦康凯琼脂分离培养 血平板分离纯培养 血清学鉴定 细菌鉴定 药敏试验 报告 4、报告方式: 以分离目的菌种的结果而决定,如: 目前常规以SS/HE 和中国蓝或伊红美兰分离粪便中的致病菌,阳性者应报告“沙门菌或 志贺氏菌”,阴性应报告“未检出沙门菌属或志贺菌属”.其他培养结果报告方式与上述原则基本相同. 5、注意事项 （1）人类肠道中的细菌种类繁多，数量亦多，在健康人肠道内经常寄居的大量的细菌，一旦肠道发生病理改变时，就可能 侵入病变部位而引起疾病。 （2 ）提高阳性检出率必须注意：标本要采集新鲜的、陈旧标本大大影响阳性检出率。 （3 ）痢疾患者要采集大量脓血部位进行培养。 (4)切勿粪尿混合否则也会影响阳性检测率。 穿刺液培养常见的病原菌 革兰氏阳性菌 革兰氏阴性菌