中药制剂检测技术 知识点：甲醇量检查法 项目4任务7知识点1-《中药制剂检测技术》电子讲义.docVIP

《中药制剂检测技术》电子讲义 知识点 甲醇量检查法 学时 1学时 教学内容 甲醇量检查法的仪器与材料、操作方法、计算方法、结果判断、注意事项与应用实例。 教学重点 操作方法、计算方法 教学难点 计算方法 参考资料 中药制剂检测技术，田友清，人民卫生出版社，2018年 中药制剂检测技术，张钦德，人民卫生出版社，2013年 中药制剂检测技术，卓菊，中国医药科技出版社，2013年 讲义内容： 甲醇量检查法 甲醇是无色易挥发液体，对人体视神经危害较大，一般服用量在7~8ml即可引起失明，30~100ml可致死亡。因酒剂和酊剂在制备过程中有可能引入甲醇，故《中国药典》规定酒剂和口服酊剂要进行甲醇量测定。除另有规定外，酒剂或酊剂中甲醇量不得过0.05%（ml/ml）。除另有规定外，均采用GC法来测定甲醇的含量。根据气相色谱所用的色谱柱不同，又分为第一法（毛细管柱法）和第二法（填充柱法）。 一、测定原理 第一法：毛细管柱法是采用外标法测定酒剂或酊剂中的甲醇含量。取供试品溶液和对照品溶液分别注入气相色谱仪，记录色谱图，根据色谱图中甲醇峰的峰面积或峰高与其浓度或质量之间的比例关系，计算出供试品中甲醇的含量。 第二法：填充柱法是采用气相色谱内标-校正因子法测定酒剂或酊剂中的甲醇含量。即取含有内标物的供试品溶液和含内标物的对照品溶液，分别注入气相色谱仪，记录色谱图，根据甲醇和内标物的峰面积或峰高与其浓度的比例关系，计算出供试品中甲醇的含量。 二、仪器与试剂 气相色谱仪、氢火焰离子化检测器、色谱柱[填充柱：直径为0.18~0.25mm二乙烯苯-乙基乙烯苯型高分子多孔小球作为载体；毛细管柱：（6%）氰丙基苯基（94%）二甲基聚硅氧烷为固定液]、电子天平（感量0.0001g）、量瓶（10ml、100ml）、微量注射器或自动进样器、顶空进样瓶等。正丙醇（内标物）、无水甲醇（对照品）等。 三、操作方法 1.毛细管柱法 （1）色谱条件与系统适用性试验：采用（6%）氰丙基苯基（94%）二甲基聚硅氧烷为固定液的毛细管柱；起始温度为40℃，维持2分钟，以每分钟3℃的速率升温至65℃，再以每分钟25℃的速率升温至200升，维持10分钟。进样口温度200℃，检测器（FID）温度220℃，分流进样，分流比为1：1；顶空进样平衡温度为85℃，平衡时间为20分钟。理论板数按甲醇峰计算应不低于10000；甲醇峰与其他色谱峰的分离度应大于1.5。 （2）对照品溶液的制备：精密量取甲醇1ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。 （3）供试品溶液的制备：取供试品作为供试品溶液。 （4）测定法：分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各3ml，置10ml顶空进样瓶中，密封，顶空进样。按外标法以峰面积计算，即得。 2.填充柱法 （1）色谱条件与系统适用性试验：用直径为0.18~0.25mm二乙烯苯~乙基乙烯苯型高分子多孔小球作为载体，柱温125℃。理论板数按甲醇峰计算应不低于1500；甲醇峰、乙醇峰与内标物质各相邻色谱峰之间的分离度应符合规定。 （2）校正因子测定：精密量取正丙醇1ml，置100ml量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为内标溶液。另精密量取甲醇1ml，置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，置100m量瓶中，精密加入内标溶液10ml，用水稀释至刻度，摇匀，取1μl注入气相色谱仪中，注入气相色谱仪，测定，即得。 四、注意事项 1.如采用填充柱法时，内标物质峰相应的位置若出现杂质峰，可改用外标法测定。 2.采用填充柱法时，在使用无水甲醇前必须用本法确定不含正丙醇，而正丙醇必须确定不含甲醇。 3.采用填充柱法时，检测器和进样器温度可根据保留时间及分离情况适当调整。 4.试验时，应作平行试验，即精密量取供试品和对照品各2份，准确配制供试品溶液和对照品溶液各2份，按规定方法测定。 5.手工进样量不易精确控制，特别注意留针时间和室温，尽量使操作条件一致。 五、记录与计算 记录仪器型号、载体、内标物、柱温、检测器、系统适用性试验数据、供试品溶液和对照品溶液的制备、测定数据等。计算： 1.毛细管柱法 2.填充柱法 a.校正因子计算 b.供试品含量甲醇量的计算 六、结果判断 两次测定的平均相对偏差应小于10%，否则应重新测定。根据测定的平均值计算，将计算结果与药品标准相比较，若含供试品含甲醇量低于或等于0.05%（ml/ml），则符合规定；若含甲醇量高于0.05%（ml/ml），则不符合规定。 七、应用实例 寄生追风酒甲醇量检查：本品是由独活、白芍、槲寄生、熟地黄、杜仲（炒）、牛膝、秦艽等十五味药，用白酒浸渍、渗漉，再与糖浆混合而制得。其甲醇量检査采用GC法，方法如下：