女性乳腺肿瘤的傅里叶变换红外光谱鉴别方法的探索..docx

分析化学（FE NXI H UAX UE 研究简报第1期 2001 年 1 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 63 ~ 65 第 29 卷女性乳腺肿瘤的 傅里叶变换红外光谱鉴别方法的探索 霍红王幸福车迅黄威东3 （中国科学院大连化学物理研究所，大连116012胡 祥 关宏伟（大连医科大学 附属第一医院，大连116011摘 要 通过75例女性良、恶性乳腺肿瘤及正常乳腺 组织的傅里叶变换红外光谱（FTIR对比研究发 现，它们之间存在着明显而规律的光谱差异?这反映了组织中蛋白质，核酸和脂 类等生物分子在不同性 质的乳腺肿瘤中的构型与构像以及相对含量上的差别。研究表明,FTIR可从分 子水平上揭示肿瘤组织 的特性，能对良、恶性乳腺肿瘤的鉴别提供丰富而可靠的结构信息，极有可能发 展成为一种肿瘤鉴别方 法。 关键词傅里叶变换红外光谱，乳腺肿瘤 1引 言 目前，临床医生虽可结合多种方法对肿瘤进行诊断，但最终确定肿瘤性质，良、 恶性程度等还是要依靠病理学诊断。然而,非量化的病理学诊断操作过程烦琐，且常 受人为因素影响。人体的各种组织包括肿瘤都是由蛋白质、核酸、糖类和脂类等组 成的只是各成分的组成比例和分子的空间物理化学排列（构型与构象各不相同。 因此，各种组织的红外光谱具有相似性，当发生癌变时FTIR能够反映出组织中与 1,2〕生物学行为密切相关的生物分子在结构及组成上的变化?从而揭示肿瘤组 织的结构特性。Benedetti〔 3,4〕和Wong〔等曾对白血病、肺癌、结肠癌和宫颈癌组织（细胞开展了红 外光谱研究，但对位居女性肿瘤 5~刀发病率首位的乳腺肿瘤研究却鲜见报道〔。 2实验部分 2.1仪器与样品 BI O 2RAD FTS 40傅里叶变换红外光谱仪（美国伯乐公司JUNG CM 1800冷 冻切片机（德国莱卡公司。 75例样品（其中正常乳腺组织10例，良性肿瘤组织19例,癌组织46例全部由 大连医科大学附属第一医院提供，并均经病理确认。 2.2实验方法 上连续切片。厚10将手术中取得的乳腺组织分别取材，按病理切片要求于冷冻 切片机（-22 °C pm的薄片于BaF2晶片上，真空干燥后进行光谱分析;厚5pm的薄片于载玻片 上进行病理诊断。3结果与讨论 本文分别以最常见的乳腺纤维腺瘤和单纯癌为良、恶性肿瘤的代表，参照正常 乳腺组织，对它们的主要光谱特征加以鉴别分析。 3.1氢键化的vN-H谱带的鉴别 与正常组织及良性乳腺肿瘤相比,癌组织中位于3600 ~ 3120cm-1间的蛋白质 的氢键化N-H基团 v的伸缩振动（N-H谱带变窄且向低波数位移（图lao二阶导数光谱表明其最 大吸收带由3条谱带 (3323,3306,3286cm-1叠加而成。这3条谱带的相对强度在3种组织中呈规律 性变化(图lb。该光谱特征表明在不同性质的乳腺肿瘤组织中维系蛋白质二级结构 的N -H ...O =C氢键化形式和程度是不同的、据此可以预测蛋白质特定生物活性方 面的一些差别。 2000201230 收稿;2000208224 接受。 图1乳腺组织中NH基团伸缩振动红外光谱 Fig. 1 In frared spectra in the N 2H stretiching region a.原光谱（superim posed orginal spectra of breast tissues ; b 1 二阶导数光谱 （corresponding second 2derivative spectra o 11 正常组织（normal ;21 良性肿瘤（benign ;31 恶性肿瘤（malignant。 vC -H振动谱带的鉴别312 消除脂肪干扰的条件下,2874和2955cm-1谱带分别为 CH 3的对称和反对称伸缩振动，主要源于膜脂质末端和膜 蛋白中的CH 3;2853,2927cm-1谱带分别为CH 2的对称和反 v对称伸缩振动，主要为膜脂质的贡献（图2O CH2与vCH 3 吸收强度的差别,说明癌组织中CH 2和CH3基团数目比 （N CH 2/N CH 3高于良性肿瘤和正常组织。而vCH 2两谱带在3 种组织中发生的规律性位移则在一定程度上反映膜脂质次 甲基链的堆积特征和脂质双层的有序/无序性质。 3?3核酸分子的磷酸二酯基团谱带的鉴别 -起因于核酸中磷酸二酯的对称伸缩振动v图2乳腺组织中C 2H基团的伸缩 振动红外光s（PO2 1083 cm-1谱带（图3a和1548cm-1谱带的吸收度比（A 1083/A 1548谱 可半定量地表示组织细胞中DNA的相对含量。癌组织和Fig. 2 In frared spectra in the C 2H stretching region良性肿瘤组织的该比值分别为