培养基的一般常用成分.doc

水 制备培养基必须使用纯净的，无微彊金属，杀菌性和抑菌性化学物质的蒸镭水。注意, 以加氯的水进行蒸镭所得的蒸镭水，即使在使用前通过离了交换树脂，也偶含有显著量的 游离氯.所以应进行测试，如正联甲苯胺试验显色。测试品，以硫代硫酸钠屮和后或进行 重复蒸憎后才能使用。 琼脂 琼脂俗称洋菜，英文名agar ,为由海藻类(主要足石花菜)提取出來的一种胶体多糖, 即半乳聚糖水解麻，产生半乳糖及少暈兀烷糖和有机硫。其化学性质系为一种不带侧链的半 乳聚糖貳，含有90%右旋半乳糖和10%左旋半乳糖。在约每10个毗喃半乳糖单位有一个首 位或次位的疑基被硫酸脂化。其阴离了脂组(-so2-oh )主要是与钙结合，但也有少数是和 镁、钠、或钾结合。 其制造方法，一般是在每年7-9月收集海屮石花菜，洗涤并经晒干后保存。于冬季冰 冻开始时，按1： 30比例将干藻放入水屮点沸，然后加入硫酸少许并点沸5-6小时。过滤 后待冷，用“漏子”推成粗条，再经日晒夜冻2-3周后，即成条状琼脂。 除少数菌种外，绝大多数细菌都不能分解琼脂，因而琼脂在培养某屮无营养价值，只是 在液体培养基屮凝结成半固体或固体培养基而已。 国外商售琼脂一般比较纯净，国内琼脂则含有杂质较多，故在使川前应先川冷水浸泡洗 涤后才能使用。 供细菌培养使川的品质优良的琼脂应具有下列特性： (1 )凝固点不超过2 °C ,通常范|韦|在34?38 °C。 (2 )1L的1.5%琼脂，在蒸汽浴屮重新完全溶化，不超过45分钟。 (3 )在98 °C能完全溶解了水。 (4 )在45 °C仍保待足够的液态，以利于试验时的混合均匀。 (5 )与水的结合水平至少在50%以上，以保证完全的溶解性。 (6)含水量不超过原重17%o (7 )燃烧残余物不超过3 %。 (8)金属最高允许含量,铅0. 0005%,铁0. 001%,镁0. 1%,钙0.2%,钠0.4%,并不 得含有抗菌物质。 (9 )透明度：在蒸镭水屮加热溶解示，呈微乳白色透明凝块。无混浊沉淀及微粒。 （10 ）凝胶强度：即在1. 5%琼脂平板lcm2表面上于20秒钟内使其破坏的最小重量（g）。 优良琼脂应在300-400克。 在实际应用屮，一般均将琼脂做成按0. 5%的并距，递增至3%的生理盐水琼脂平板，然 后用接种环或接种针试行划线涂布，以决定该批琼脂实际使用的浓度。 （三）蛋白豚和蛋白质水解物 蛋白质分了在水解过程屮生成一系列的产物。这些产物按其复杂程度而分的次序是；月 示，腺，多肽，最后产物是氮基酸。有些氨基酸在早期的水解过程屮就可裂解出来。 月不和腺并不是均性的化学实体，而是原始蛋白质分了断片的混合物。月不和）1 东在纟H?成 上及大小上各不相同，将其归于一类仅权是因为都表现有某些共同的特性Z故。在各种断片 屮，当溶液被硫酸镀半饱和时沉淀而出的称为初级刀示，被硫酸彼全饱和时沉淀而出的称为 次级月示。而U东则不发生沉淀。月不仍表现有胶体性质，但L2有逐渐减少的趋势。待蛋白质 分了分解至豚的阶段时，胶体性质U完全消失。因此，豚除去硫酸僅饱和时不发生沉淀外, 还可以扩散透过火棉胶薄膜，也不呈现蛋白质某些特殊的沉淀反应。 因为月不和腺都是原始蛋白质分了断片的菲均相混介物，因此不同的制备方法将使月不 和腺在组成上及性质上有所差异。这些井异决定于用作原始材料的蛋白质的木质，水解方法 以及用于分离各种产物的方法。因此，市儕的备种蛋白）1 东在组成上是互有弟别的，所以在使 用时应对各种蛋刚东和蛋白质水解物的成分及英特点有所了解，依据使用的目的和要求加以 选用。 蛋H豚的主要川途是供给细菌需要的氮源。为制备备种培养基报常使川的成分乙一。 蛋白豚之的特点为:（1）易溶于水；（2）不因受高热而凝固（加热至130°C也不凝固）, 且可被细菌肓接利用以助生长；（3 ）系两性电解质，故有缓冲作用。 水解动物蛋门质的酶类有动物消化腺，如胃蛋门酶和胰蛋白酶等。植物蛋门质最常用的 为木瓜酶，此外还有分解酵母时用的自溶酶等。 胃蛋白酶分解蛋白质的结果，能得到含有蛋片分了?较大碎片的产物（月示和月东），具有 显著的双缩丿嫌反应，此外还有较少暈的低级多肽类和游离氨基酸。在这种蛋白H东中生长素很 少，故不宜单独用作培养基，必须和肉浸液等混介使用。胰蛋白酶消化的蛋白制品的特点是 其成分屮有很多游离的氨基酸，特别是色氨酸，低级的多肽类，含蛋白腺和蛋白月示较少, 所以貝营养价值比胃蛋门酶所消化蛋白质的粗制品要高得多，比肉浸液加蛋口脈也要好得 多，因大多数细菌在生长时最易利用游离的氨基酸，其次才是蛋白腺。 近年来国外商售蛋白腺品种增加很多，备种牌号也□新月异。 1.胰化酪蛋白腺 Peptone from Casein, trypsin digested（E. Merek） 木品为胰航酶消化酪航所得的