DNA 聚合酶 : G A A T T C C T T A A G 将多个核苷酸连接 能形成多个磷酸二酯键 形成一条 DNA 链 DNA 连接酶: 连接两 DNA 片段之间的磷酸 二酯键 即脱氧核糖、磷酸基之间的 连接 只完成两个二酯键 , 形成双链 P P P P P G A T C C 三、“分子运输车” —— 基 因进入受体细胞的载体 思考 思考 2. 1. 谁来当这个车呢? 为什么还用车呢? 常用的是质粒。 要让一个从甲生物 细胞内取出来的 目的 基因(外源基因), 在乙生物体内进行表 达,先得将这个基因 转移 乙生物的细胞内, 再 复制、表达 ! 这个工具车就是 载体 。 大肠杆菌细胞 质粒 是细菌拟核以外的 小型环状 DNA , 可自主复制 拟 核 思考 3. 这个“车”需要什么条件呢? 1 能在宿主细胞(受体细胞)内复制并稳定的保存 2 具备多个限制酶的切 点,便于与目的基因 连接 3 具有特性的标记基因,便于筛选 (如四环素抗性基因、氨苄青霉素 抗性基因) 小结 三、 “分子运输车” —— 载体 : 作用: 目的基因 转移 到受体细胞 目的基因在受体细胞内 复制 是 细菌拟核以外的小型环状 DNA ,可复制 常用: 质粒 条件: 其他的: 1 能在宿主细胞(受体细胞)内复制并稳 定的保存 2 具备多个限制酶的切点,便于与目的基 因连接 3 具有特性的标记基因,便
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