外源基因表达机制.ppt

2) 蓝藻表达载体 ? 复制子：含有在大肠杆菌中起始复制的序列 和蓝藻中复制起始序列． ? 启动子：可调控的启动子 * 细菌基因表达启动子 (nos) * 嗜菌体基因表达启动子（ P L ,P R ) * 金属硫蛋白基因启动子 * 热休克蛋白基因启动子 * 光诱导表达启动子 ? 选择标记基因 3) 蓝藻细胞中高效表达外源基因 ＊ 提高外源基因在蓝藻中的拷贝数 ＊ 组装含强启动子的外源基因表达盒 ＊ 以多种形式表达外源基因产物 2. 酵母基因表达系统 酵母菌是一类以芽殖或裂殖进行无性繁殖的单细胞 真核生物，是理想的真核生物表达系统，具有以下 特点 ： * 基因表达调控机理比较清楚，遗传操作简单 . * 具备真核生物蛋白翻译后修饰加工系统 . * 不含特异性病毒，不产生毒素，安全 . * 大规模发酵简单，成本低廉 . * 能将外源基因表达的产物分泌到培养基中 . 1) 酵母基因表达载体 酵母基因表达载体由酵母野生型质粒，原核生物质 粒载体和酵母染色体的功能基因共同组成． ? DNA 复制起始区：包括大肠杆菌中起始复制序列和酵 母菌中起始复制的序列（ 2 ? 质粒复制起始序列，酵 母基因组中自主复制序列）． ? 选择标记基因：营养缺陷型选择标记和显性选择标 记（遗传霉素 G418, 放线酮） . ? 有丝分裂稳定区：来源于酵母染色体着丝粒片断． ? 表达