多杀巴氏杆菌病的试验室诊断.ppt

实验三 多杀巴氏杆菌病的实验室诊断 （一）病鸡剖检及细菌学检查 实验目的 ? ? ? ? 1. 掌握禽霍乱病鸡的检查和剖解方法 2 ．掌握禽霍乱组织涂片、染色和镜检的步骤和方法 3. 熟悉多杀性巴氏杆菌两极染色的形态特征 4 ．掌握病原菌分离培养的操作方法 仪器和材料 1 ．仪器：解剖刀、骨钳、镊、解剖板、脸盆，毛刷、 器皿、剪刀、镊子，接种环，酒精棉，酒精灯，显微镜， 载玻片，革兰染色染料（草酸铵结晶紫、革兰氏碘液、 95 ％乙醇、蕃红染液），瑞氏染液，香柏油等。 2 ．实验材料：多杀性巴氏杆菌感染病死鸡 。 3 ．培养基：鲜血营养琼脂培养基、麦康凯琼脂培养基 ? ? ? 操作步骤和方法 1 ．无菌取病鸡病变组织（肺、肝、脾 …… ）， 接种鲜血营养琼脂和麦康凯琼脂，将培养皿标 记后置 37 ℃ 温箱，培养 24 小时后观察结果。 ? 2. 病料涂片 用镊子夹持病变组织，用灭菌 剪刀剪取一小块，在载玻片触片。当触片干燥 后，进行染色检查 . ? 3. 剖检变化观察。 ? 附：瑞特氏染色法： 在干燥的抹片上，按抹 片点大小盖上一块略大的滤纸，其上滴加染液， 略浸过滤纸，并视情况补滴，维持湿润状态、 染色 1 ～ 2 分钟，然后滴加等量缓冲液，使之与 染色液均匀混合，作用 2~3 分钟，至生出金属 ? 思考题 ? ? ? 1 ．掌握禽霍乱的临床症状及病理变化的特征。 2