水产动物营养与饲料 饲料检测仪器 紫外分光光度计的使用.docVIP

水产养殖技术专业教学资源库 PAGE 3 分光光度计的使用 分光光度法是利用物质对光具有选择性吸收的特性而建立起来的一种定性或定量分析技术，也称为吸收光谱法。 是光谱分析技术中最常有的一种，应用最多的是紫外及可见分光光度法。 分光光度法所使用的光谱范围主要是波谱图中200～1000nm为一段波长的光谱。 紫外光区200～400nm；可见光区400～760nm；红外光区760～1000nm1。 一、工作原理 一束单色光通过有色溶液时，部分光线被吸收，末被吸收的部分投射到光电管上，光电管将光能转变为电能，结果就出现光电流，光电流的强弱与溶液的吸光量强弱有关。 即若溶液的厚度不变，则溶液的浓度愈大，吸光度就愈大；反之，溶液的浓度愈小，吸光度就愈小。 二、使用方法 1.分光光度计准备 通电仪器自检预热20min; 2.用键设置测试方式: 透射比(T),吸光度(A),已知标样浓度方式(C)和已知标样浓度斜率(K)方式; 3.波长选择: 用波长调节旋钮设置所需的单色光波长; 4.放样顺序: 打开样品室盖,在1~4号放置比色皿槽中,依次放入%T校具(黑体),参比液,样品液1和样品液2. 5.校具(黑体)校0.000: 将%T校具(黑体)置入光路,在T方式下按%T键,此时仪器自动校正后显示0.000 6.参比液校100%T或0.000A: 将参比液拉入光路中,按0A/100%T键调0A/100%T,此时仪器显示BLA,表示仪器正在自动校正,校正完毕后显示100%T或0.000A后,表示校正完毕,可以进行样品测定. 7.样品测定: 将两样品液分别拉入光路中,此时若在T方式下则可依次显示样品的透射比(透光度)若在A方式下,则显示测得的样品吸光度. 三、分光光度计的典型故障及其排除方法 1.仪器不能调零。 可能原因： （1）光门不能完全关闭。解决方法：修复光门部件，使其完全关闭。 （2）透过率“100%”旋到底了。解决方法：重新调整“100%”旋钮。 （3）仪器严重受潮。解决方法：可打开光电管暗盒，用电吹风吹上一会儿使其干燥，并更换干燥剂。 （4）电路故障。解决方法：送修理部门，检修电路。 2.仪器不能调“100%”。 可能原因： （1）光能量不够。解决方法：增加灵敏度倍率档位，或更换光源灯（尽管灯还亮）。 （2）比色皿架未落位。解决方法：调整比色皿架使其落位。 （3）光电转换部分老化。解决方法：更换部件。 （3）电路故障。解决方法：调修电路。 3.测量过程中,“100%”点经常变动。 可能原因： （1）比色皿在比色皿架中放置的位置不一致，或其表面有液滴。解决方法：用擦镜纸擦干净比色皿表面，然后将其安放在比色槽的左边，上面用定位夹定位。 （2）电路故障（电压、光电接收、放大电路）。解决方法：送修。 4.数显不稳。 可能原因： （1）预热时间不够。解决方法：延长预热时间至30分钟左右（部分仪器由于老化等原因，长时间处于工作状态时，也会工作不稳）。 （2）光电管内的干燥剂失效，使微电流放大器受潮。解决方法：烘烤电路，并更换或烘烤干燥剂。 （3）环境振动过大、光源附近空气流速大、外界强光照射等。解决方法：改善工作环境。 （4）光电管、电路等其它原因。解决方法：送修。