str简易操作说明.docx

STF简易操作说明 提取细胞DNA; 以细胞 DNA提取物为模板 PCR每个细胞样品都需检测 10个STR位点，分别为 Ameloge nin ,CSF1PO,D13S317,D16S539,D5S818,TPOX,D7S820,D21S11,TH01,vWA与之对应 的有10对引物，其中一条有荧光标记； PCR反应体系： 1 x体系 10X体系 ddHO 33.3 333 5x Buffer 10 100 2.5mM dNTP 4 40 引物1 1 10 引物2 1 10 模板 0.2 * X Taq酶 0.5 5 50 卩 l 498 卩 l 说明：大体系混好后 96孔板每孔分49.8卩l , X指9个细胞样品分别加 0.2卩l , 96孔 板的具体分布参考下图。 品 需 鹹胞若 ES-2 细皑容 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Saw-2 A ① ② 祥 SKOV3 E ③ ④ 品 5637 C ⑤ ⑥ HCT 116 D U251 E 耳 HEP-2 F 95D G CBC a PCR反应条件: 1 Cycle 35 Cycles 1 Cycle 1 Cycle 95 C 95 C 58 C 72 C 72 C 16C 5 min 30 sec 30 sec 30 sec 8 min 00 每个PCR样品取5ul加Loading电泳检测，勿直接往96孔板中加Loading 电泳确认每个样品都有条带后送测基康生物； 信息查询与结果比对。 i. 打开ATCC网站 ，查询各细胞 STR分型数据，以细胞Saos-2为例, 搜索结果见下图； You searched for： SAOS=2 □ matches]SERVICE OQ] STAJSIDARD W (FAQS |D|I DHKUMENT P) OTHER pD|10 Results por Page *PfiODUCTO)OBteosflfMmao)Cell OriginHuman拍唸加 You searched for： SAOS=2 □ matches] SERVICE OQ] STAJSIDARD W (FAQS |D|I DHKUMENT P) OTHER pD| 10 Results por Page * PfiODUCTO) OBteosflfMmao) Cell Origin Human 拍唸加1X U HIMO ATCC* Nuinber^ KT口业片 lis-sue: Sana- PrpduclFc^rial： Fflr-Prvnr $431.00 Ncm Proflt： 5353,1； % Add 10 (?rt ：[ATCCljCRL-iS3S^ ATCC Nuinber: ORLfgHg” lhkb￡:± Tfrft ftuifibfe8 yCrU 鸟论 ae^ntALr|$ 阳r rJ fifi- 出曲d幅惟 寸Z r) 4-/tMiI Fig.1 ii. 打开该株细胞链接，选择 SPECIFICATIO N即可看到该株细胞的 STR分型数据，见下 图； Home ? PnxhJ-cl? ? All Prcxlixls ■ HTB-S5 (ES -ru Saos-2 (ATCC HTB-85 ) D1GS539 - 12 13 D5SB18. 12 D7SB2□- 0.10 TH01.6.9 TPOX^ BvWA 1COrganism Hamoi 却新刽口 hunnnn D1GS539 - 12 13 D5SB18. 12 D7SB2□- 0.10 TH01.6.9 TPOX^ B vWA 1C GEJNERAL UN FORMATION CHARACTERISTICS CULTURE METHOD SPECIFICATIONS HISTORY DOCUMENTATION 1 STR Profile Amelogenin: X Saos-2 CSF1PO 10 曾 Rfr D13S317. 12,13 ATCC HTB-85 frozen Fig.2 注意：如果ATCC上查不到某细胞的 STR分型数据，还可以去国家实验细胞共享平台查询, 网址 / ，以细胞 Saos-2为例，搜索结果见下图。 细胞信息査询Search” saos-2分类查询—叭粪：二辺分类：三毓分类：全部- 细胞信息査询 Search ” saos-2 分类查询 —叭粪： 二辺分类： 三毓分类： 全部- * 一全部-- V 一全部-- 7 Q 供需 Y 协lSt^-2012版 Fig.3 分类雪诃 1禺骨魏 -itp- * -哇部.- * ?主那- :-■ nr | T藹Aiffl手中丈茗和 9iKtKt? mi 9 immiDPt