保健食品中槲皮素山柰素异鼠李素的高效液相色谱测定.docxVIP

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2021-02-03 发布于天津
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保健食品中槲皮素山柰素异鼠李素的高效液相色谱测定.docx

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保健食品中槲皮素山奈素异鼠李素的高效液相色谱测定 Determineation of quercetin 、 keampferol 、 isorhamnetin by high - performance liquid chromatogramphy in health food 1. 适应范围本方法规定了以银杏叶或银杏叶提取物为主要原料生产的保健食品中槲皮素、山奈素、异鼠李素含量的 HPLC测定方法。本方法适用于以银杏叶或银杏叶提取物为主要原料生产的保健食品中槲皮素、山奈素、异鼠李素含量的 HPLC测定方法。本方法的检测限分别为：槲皮素0.002卩g、山奈素0.003 卩g、异鼠李素0.005卩g。方法原理试样经提取、水解等前处理后，使用等度洗脱反相高效液相色谱进行分离，紫外检测器（ UV检测，根据色谱峰的保留时间定性，外标法定量，测定试样中甙元槲皮素、山奈素、异鼠李素含量。试剂实验用水为去离子水。 3.1甲醇：色谱纯。 3.2高效液相色谱流动相：甲醇+水（50 + 50）（以磷酸调节 pH = 2.5）。 3.3槲皮素、山奈素、异鼠李素标准品：含量大于 98 % （HPLC ）。 3.4槲皮素、山奈素、异鼠李素标准溶液的配制分别准确称取100mg槲皮素、山奈素、异鼠李素标准品于100mL容量瓶中，加入甲醇溶解后，定容至刻度，此溶液浓度为1.0mg/mL ,将该液稀释成10?100mg/L的标准系列溶液. 仪器设备 4.1高效液相色谱仪：附紫外检测器。 4.2水浴锅。 4.3超声波清洗器。 4.4离心机。分析步骤 5.1试样处理：取试样适量，用 20mL甲醇于超声波浴中提取30分钟，过滤后滤液加入 20mL 1.5mol/L盐酸于水浴上回流水解3小时，冷却后用甲醇定容至 50mL ,该样液过0.5 pm 膜，滤液进HPLC分析。 5.2测定： 5.2.1液相色谱参考条件 5.2.1.1 色谱柱：反相 Ci8柱，5pm, 100?, 3.9mm ID xi50mm 521.3 流速：1.0mL/min 521.4柱温：室温 5.3.1色谱分析取10卩L标准溶液及试样提取液进高效液相色谱分析，以保留时间定性，用峰面积以外标法定量计算试样中槲皮素、山奈素、异鼠李素的含量。 5.分析结果的表述 7.1计算试样中槲皮素、山奈素、异鼠李素的总含量: X % = Q% + K% + 1% 式中：-Q% 试样中槲皮素含量； K% 试样中山奈素含量； 7% 试样中异鼠李素含量; 7.2结果表示：分析结果保留三位有效数字。 7. 色谱图