ABO血型正定型标准操作规程[借鉴].docxVIP

标 准 规 范 20XX standard E ABO血型正定型规范操作规程 一．意图：规范ABO血型正反定型的操作。 二．适用范围：适用于ABO血型正反定型。 三．支撑性文件：全国临床查验操作规程第二版。 四．原理：依据红细胞上有或无A抗原或／和B抗原，将血型分为A型、B型、 AB型及O型。可利用红细胞凝集实验，经过正反定型精确断定ABO血型。 所谓正定型，是用已知抗A和抗B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或／和B抗原； 五．仪器：离心机。 六．试剂： 1．抗A、抗B分型血清；定时进行效价滴定,以保分型血清质量功能符合要求。抗A：1∶128，抗B：1∶128。 七．样本要求： 1．红细胞 可用针刺手指采血，并直接用生理盐水稀释制成5%红细胞悬液； 也可静脉采血，用1∶9枸橼酸钠抗凝．。 2．血清 取静脉血将血液沿管壁渐渐注入枯燥试管中，待天然凝结后用玻璃 棒悄悄搅动血块，使之与试管壁别离。或置37℃水浴1小时，使血块缩短 离心别离血清。 八．操作过程： 1．取洁净小试管3支，别离标明抗Ａ．抗Ｂ和抗A＋B，用滴管别离加抗Ａ．抗B和抗A＋B分型血清各1滴于试管底部，再以滴管别离参加受检者5%红细胞悬液1滴，混合。 2．另取洁净小试管3支，别离标明A、B和O细胞；用滴管别离参加受检者血清1滴于试管底部，再别离以滴管参加A、B和O型5%试剂红细胞悬液1滴，混合。 3．用离心机以1000r／min离心1分钟；或3400r/10秒。 4．将试管悄悄摇摆，使沉于管底的红细胞浮起，先以肉眼调查有无凝集（溶血）现象。如肉眼不见凝集，应将反应物倒于玻片上，再以低倍镜查看。 5．调查成果时既要看有无凝集，更要留意凝集强度，此有助于A、B亚型；类B或cisAB的发现。 6．凝集强度判别规范： 4＋＝红细胞凝集成一大块，血清明晰通明 3＋＝红细胞凝集成数小块，血清尚清 被断定血的血型 抗A（B型） 抗B（A型） A 型 + — B 型 — + O型 — — AB型 + + 九．留意事项 1．调查成果时不行用力振摇； 2．严厉按规程操作，防止操作失误，避免从头实验浪费时间和试剂； 3．实验完毕后，试剂置2-6℃冰箱保存，避免试剂中的免疫球蛋白蜕变 聚凝胺法穿插配血实验操作规程1.??意图：检出和断定意外抗体。2.??原理：凝集胺溶解后产生的阳离子中和红细胞外表的唾液酸使红细胞距离缩短，产生由IgG直接搭桥的可逆的非特异性凝集，当非特异性凝集回复时，只剩下由抗原抗体搭桥的特异性凝集。3.??适用范围：配血。4.??所需资料：聚凝胺试剂、、洁净试管、滴管、离心机5.??操作程序：5.1??以生理盐水洗刷受血者和献血者红细胞1—3次，配成3-5%的悬液。5.2??穿插配血实验：主侧：2滴患者血清加1滴供者3-5%的RBC悬液。次侧：2滴供者血清加1滴患者3-5%的RBC悬液。。5.3??每只试管加4滴低离子液，混合放置1分。5.4??别离加2滴Polybrene使用液，混合放置15秒。5.5??离心3400转/分15秒，弃上清，控干。5.6??调查管底有无聚凝物，假如没有则需重做。5.7??每管各加2滴解聚液，悄悄混合10秒，调查成果并做记载。5.8??成果断定：10秒内若为Polybrene引起的聚合应该会散开，判为阴性。若为抗原抗体引起的凝集则不会散开，判为阳性。6.??留意事项：6.1??可以用EDTA血浆替代血清6.2??参加解聚液后应该在3分钟之内调查成果6.3??解聚液不行多加，避免下降实验灵敏度