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绪 论
1 前言
1 前言
1 前言
1 前言
2 课程设计
以基因克隆及其应用和特定基因的表达分析为线索，介
绍分子生物学最基本的实验技术与方法，培养大家从事
分子生物学相关科学研究的基本实验技能和科研思维。
4个系统的综合性实验
碱性磷酸酶AKP表达菌株的构建及其表达分析
GFP转基因烟草
小鼠白介素2基因表达分析
小麦基因组DNA的提取及Southern杂交
2 课程设计
碱性磷酸酶AKP表达菌株的构建
及其表达分析
• PCR法获得目的基因AKP
• 碱裂解法提取质粒DNA
• DNA重组：双酶切与连接
• 重组DNA转化克隆菌株
（热激法）
• 重组子的筛选（表型、核酸电泳、
双酶切法等）
2 课程设计
碱性磷酸酶AKP表达菌株的构建
及其表达分析
• 重组质粒转化表达菌株
• AKP的诱导表达
• 表达产物的分析（活性、SDS-
PAGE 、Western 印迹）
2 课程设计
2 课程设计
小鼠白介素2基因表达分析
小鼠
小鼠脾细胞原代培 小鼠脾细胞原代培
养（药物处理） 养（对照）
实时荧光定量PCR
分析白细胞介素2 总RNA的提取
（lnterleukin-2,
IL-2 ）基因的表达
2 课程设计
小麦基因组DNA的提取及Southern杂交
基因组DNA
的提取
Southern blot
3 课程特色
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