clsi临床质谱新标准解读.pdfVIP

精品文档 CLSI 临床质谱标准 C62-A 新内容解读 CLSI 临床质谱标准 C62-A 主题内容架构由基础内容部分包括（ 1）范围、 （2）标准预 防措施、 （3 ）术语、 （4 ）仪器；方法内容包括（ 5 ）预考察事项、 （6）方法建立、 （7）方法 验证；质控内容包括（ 8）液质检验方法的质量保证与质量控制、 （9）后续监督构成。其中 方法 和 质控 内容是与应用过程直接相关的。下面进行具体介绍。 5．预考察事项（ preexamination considerations ） 5.1 目标分析物 内容包括 5.1.1 外源性物质、 5.1.2 内源性物质、 5.1.3 外源性和内源性物质的相关因素、 5.1.4 样本采集。 要充分了解目标分析物的性质，包含（ 1）目标分析物的临床意义如生理意 义、临床价值、常用检测方法等； （2 ）理化性质如结构式、分子量、沸点、极性大小、酸碱 性等； （3 ）存在形式如游离型、结合型； （4 ）干扰因素如类似物、同分异构体、其他代谢产 物等； （5 ）预期浓度如常量级、微量级、参考区间浓度、切点浓度、病理浓度等； （6）样本 类型如血清、血浆、全血、尿样、唾液、胆汁、组织等； （7 ）采集和处理方式如静脉血、足 底血、指尖血、离心处理或静置、何种采血管等； （8）储存和运输方式如避光、冷藏、冷冻 等。 5.2 内标 内标可以校正基质效应或者样本萃取、 色谱分离、 离子化过程中产生的偏差， 有利于提 高定量分析的准确性和精密度及方法稳定性。 5.3 试剂和耗材的质量 5.3.1 试剂盒耗材的质量：由于 MS 灵敏度高，因此试剂和耗材要求也高。在使用前应 对试剂、耗材进行验证，避免其中杂质对 MS 的影响。使用过程中应按照 SOP 进行保存、 操作，避免污染。按照 ISO 17025:2017 进行批间次管控。 5.3.2 实验室设备：配置校准品和内标时，实验室应使用 A 级的容量瓶和移液器。 6．方法建立（ assay development ） 6.1 离子转变（ ion transition ） 在建立和优化质谱采集参数的过程中， 要先配制标准物质溶液直接导入质谱检测器进行 质谱扫描，获取目标化合物的相关信息。根据目标分析物的极性选择合适的离子化方式： . 精品文档 ESI 源适合中等偏大极性化合物、难挥发化合物或热不稳定化合物； APCI 源适合有一定挥 发性的中等极性或低极性的小分子化合物。 根据化合物的功能基团选择正负离子模式， 然后 选择合适的离子对分别作为定量离子对和定性离子对。 之后， 优化化合物参数， 包括离子源 参数以及质谱扫描参数，使所选择的离子对质谱响应值最高。 6.2 高效液相色谱固定相 色谱柱种类繁杂， 色谱柱选择通常取决于目标分析物的元素组成和化学结构。 弱极性固 定相有 C18、C8 、苯基柱等，极性固定相有氨基柱、氰基柱、硅胶柱等。要注意色谱柱的 耐压范围和 pH 使