2018_2019学年高中生物专题1基因工程1.2基因工程的基本操作程序课件新人教版选修[文字可编辑].pptVIP

探究一 探究二 易错点排查 【例题 2 】 下列用于判断目的基因是否转移成功的方法中 , 不属于分 子检测的是 ( ) A. 通过害虫吃棉叶看其是否死亡 B. 转基因生物基因组 DNA 与 DNA 探针能否形成杂交带 C. 转基因生物中提取的 mRNA 与 DNA 探针能否形成杂交带 D. 转基因生物中提取的蛋白质能否与抗体形成杂交带 解析 : 分子水平的检测包括三个方面 : 通过 DNA 杂交检测目的基因是 否插入受体细胞染色体的 DNA 上 ; 通过 RNA 与 DNA 杂交 , 检测目的基因 是否转录 ; 通过抗原 — 抗体杂交 , 检测目的基因是否翻译。通过害虫取食棉 叶看其是否死亡 , 属于个体生物学水平的检测。 答案 : A 1 . 2 基因工程的基本操作程序 情境导入 课程目标 1 . 简述基因工程原理和技 术。 2 . 用流程图表示基因工程 的基本操作程序。 3 . 用流程图表示目的基因 的检测与鉴定程序。 4 . 列表比较几种转化方法 的异同和目的基因检测与 鉴定的几个环节的异同。 5 . 尝试设计某一转基因生 物的研制过程。 6 . 关注基因工程的发展。 将苏云金芽孢杆菌 ( 图一 ) 的毒蛋白基因提取出来 导入普通棉花 ( 图二 ) 细胞可培育成转基因抗虫棉 ( 图三 ), 从毒蛋白基因的提取到成功培育成抗虫 棉 , 基本的操作程序是怎样的 ? 每一操作环节的 原理和技术是怎样的 ? 一 二 三 四 基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤 : 目的基因的获取 、 基因表 达载体的构建 、 将目的基因导入受体细胞 、 目的基因的检测与鉴定 。 一、目的基因的获取 1 . 目的基因主要是指编码 蛋白质 的基因。 2 . 获取目的基因的常用方法有以下几种 : (1) 从 基因文库 中获取目的基因。 将含有某种生物不同 基因 的许多 DNA 片段导入 受体菌 的群体中储存 , 各个 受体菌 分别含有这种生物的不同的基因 , 称为基因文库。 基因文库包括两种 : 基因组 文库 , 即包含一种生物所有基因的文库 ; 部分 基因 文库 , 即只包含一种生物一部分基因的文库 , 如 cDNA 文库。 一 二 三 四 (2) 利用 PCR 技术 扩增目的基因。 ① PCR 的含义 : 是一项在生物 体外 复制特定 DNA 片段的核酸合成技术。 ②目的 : 获取大量的目的基因。 ③原理 : DNA 双链复制 。 ④过程 : 第一步 , 加热至 90~95 ℃ , DNA 解链 ; 第二步 , 冷却到 55~60 ℃ , 引物结合到互补 DNA 链 ; 第三步 , 加热至 70~75 ℃ , Taq 酶从引物起始进行互补链的合成 。 如此重复循环多次。 ⑤特点 : 指数 形式扩增。 (3) 用化学方法人工合成。 如果基因比较小 , 核苷酸序列 又已知 , 也可以通过 DNA 合成仪 用化学 方法直接人工合成。 一 二 三 四 轻松判断 PCR 属于 DNA 片段的复制技术 , 操作时也存在 使 DNA 解旋的环节。 PCR 的 DNA 解旋和体内 DNA 复制的解旋有何区别 ? 提示 : PCR 的 DNA 解旋依靠高温处理 , 不需要解旋酶 ; 而体内 DNA 复制 的解旋依靠解旋酶的催化作用 , 是在常温下进行的。 一 二 三 四 二、基因表达载体的构建 1 . 构建目的 : 使目的基因在受体细胞中 稳定存在 , 并且可以 遗传 给下一 代 , 同时 , 使目的基因能够 表达 和 发挥作用 。 2 . 基因表达载体的组成 : 目的基因 、 启动子 、 终止子 、 标记基因 等。 3 . 由于 受体细胞 不同 , 以及目的基因导入受体细胞的 方法 不同 , 基因表 达载体的构建也有所差别。 一 二 三 四 三、将目的基因导入受体细胞 1 . 转化的概念 : 目的基因 进入受体细胞内 , 并且在受体细胞内维持 稳定 和表达 的过程。 2 . 常用的转化方法 (1) 将目的基因导入植物细胞 : 采用最多的方法是 农杆菌转化 法 , 除此之 外 , 还有 基因枪 法和 花粉管通道 法等。 (2) 将目的基因导入动物细胞 : 最常用的方法是 显微注射 技术。此方法 的受体细胞多是 受精卵 。 (3) 将目的基因导入微生物细胞 : 早期的基因工程都用原核生物作为受 体细胞 , 其中以 大肠杆菌 应用最为广泛。 大肠杆菌细胞最常用的转化方法是 : 先