植物组织培养第9章植物种质资源的离体保存.ppt

植物组织培养 Plant tissue culture Beans (Phaseolus spp.) 第九章 植物种质资源的离体保存 种质 （ germplasm ）是指亲代通过生殖细胞或体细胞直接 传递给子代并决定固有生物性状的遗传物质。 ? 植物种质资源 （又称品种资源、遗传资源或基因资源）是 生物多样性的重要组成部分，是选育优质、高产、抗病（虫）、 抗逆新品种的物质基础，是生物技术研究取之不尽的基因来源。 种质资源越多，其多样性越丰富， 改良品种或选育新品种 的潜力就越大 。未来的农业生产在很大程度上取决于对种质资 源的占有量和利用程度，故保持生物多样性有重要意义。 据估计，由于自然灾害和生态条件恶化，植物物种以平均 每天一个种的速度消失，物种一旦灭绝，人类将永远失去利用 它的机会。 目前，全世界有 5 ～ 6 万种植物的生存受到不同程度的威胁。 因此，搜集和保存种质资源已受到世界各国的重视。 ? ? ? ? 种质保存 （ germplasm conservation ）是指利用天然 或人工创造的适宜环境，借以保存种质资源，使个体 中所含有的遗传物质保持其遗传完整性，并且有强的 生活力，能通过繁殖将其遗传特性传递下去。 植 物 种 质 资 源 保 存 的 方 式 有 原 生 境 保 存 （ in situ conservation ） 和 非 原 生 境 保 存 （ ex situ conservation ）。 原生境保存 是指在原来的生态环境中，就地进行繁殖 保存种质，如建立自然保护区或保护小区，甚至保护 点等途径来保护作物及经济林木的野生近缘植物物种； 非原生境保存 是指种质保存于该植物原生态生长地以 外的地方， 包括 异地保存（种质圃或植物园保存）、 种质库（种子）保存、离体（试管）保存等。 ? 原生境保存和异地保存固然有其明显的重要性，但要保存 大量种质，则需耗费巨大的人力、物力和土地，在实际中 很难实施，而且易受自然灾害、虫害和病害的侵袭，造成 植物种质资源的丧失。以 种子的形式保存 时，所占的空间 较小，并且能够保存很多年，种子容易干燥、包装，便于 运输到引种中心和基因库。 种子保存存在的限制因素： ①种子生活力随贮存期的延长 会逐渐丧失； ②无性繁殖的植物（如苹果、柑橘、甘薯、 马铃薯等）难于采用种子保存； ③采用无性繁殖来保持其 优良性状的植物（如许多果树），用种子繁殖后代会发生 变异； ④顽拗型种子植物（芒果、椰子、油棕和咖啡等） 因其种子不易干燥脱水和低温贮藏，不宜用种子保存或保 存难度很大； ⑤有些植物种质是不产生种子的，如脐橙、 香蕉等； ⑥易遭自然灾害袭击而使种质资源丢失。 ? ? 种质资源离体保存 （ germplasm conservation in vitro ） 是指对离体培养的小植株、器官、组织、细胞或原生质体 等材料，采用限制、延缓或停止其生长的处理措施使之保 存，在需要时可重新恢复其生长，并再生植株的方法。 ? 离体种质保存有以下优点： ①所占空间少，节省人力、物力和土地； ② 有 利 于 国 际 间 的 种 质 交 流 及 濒 危 物 种 （ endangered species ）抢救和快繁； ③需要时，可以用离体培养方法很快大量繁殖； ④避免自然灾害引起的种质丢失。 ? 上 世 纪 70 年 代 以 来 ， 人 们 把 冷 冻 生 物 学 （ cryobiology ）和植物离体培养技术结合起来， 发 展 了 离 体 种 质 资 源 冷 冻 保 存 （ freezing conservation in vitro ） 或 超 低 温 保 存 （ cryopreservation ）技术。 随着离体种质保存技术的不断发展和完善，已经 或正在建立离体保存库。如 国家种质徐州甘薯试 管苗库 保存甘薯 1400 份， 国家种质克山马铃薯试 管苗库 保存马铃薯 900 份。 ? 离体保存方法 ：常温限制生长保存、低温保存和 ? 超低温保存。 第一节 植物种质资源的 常温限制生长保存 一、常温限制生长保存的概念 在正常条件下的组织培养不适合种质保存。 因为在 这种条件下，材料生长很快，需经常进行转接。 不仅 使保存工作量加大费用升高，也导致在转接中污染和 由取样的随机性造成基因资源的丢失。 因此，理想的保存方法是使培养物处于 无生长或缓 慢生长 状态下抑制植物的生长，减少继代次数，达到 长期保存目的。 需要时可以迅速恢复正常生长。 抑制 生长的外植体可以是茎段、茎尖及愈伤组织。 二、常温限制生长保存 的方法和原理 （一）高