拮抗黄曲霉海洋细菌的筛选、发酵及其活性物质的研究.pdfVIP

摘要 摘要 黄曲霉(Aspergillusflavus)是一种对植物生长及人体健康有着重大危害作用的真菌。误 食被黄曲霉污染的食物会出现发热、倦怠和厌食症、腹痛、呕吐、肝炎等慢性肝中毒的症 状，长期便会引发肝癌。中国作为粮食生产的大国，所以研究在种植、贮存及运输中，预 防黄曲霉污染带来的经济损失与食品安全等问题，具有重要的意义。实验室从南海海绵中 筛选出多株黄曲霉拮抗菌株，本论文对其中拮抗活性最强的菌株CL 展开研究，取得以下 结果: CL 16SrDNA 从 的培养特征、形态特征、生理生化和 序列分析等方面对该细菌进行 鉴定,确定其为芽孢杆菌属，与Bacillus velezensis strainYK50 亲缘关系最近，达到99%， 命名为Bacillus velezensis strain CL。 用响应面分析法优化了Bacillus velezensis strain CL 产抑菌活性物质的发酵条件，以单 因素实验结果为依据进行P-B 设计，确定了接种量、初始pH 和培养温度为影响抑菌活性 物质产量的主要因素；设计最陡爬坡实验确定最佳实验中心点；通过B-B 实验，最终确定 pH 5.5 3% 24 80mL/250mL 最适培养条件为：初始 、接种量 、培养温度 ℃、 装液量，培养 时间为96h。优化的培养基为50g/L 葡萄糖、25g/L 酵母浸粉。在最优条件下，抑菌圈直 3.23 cm 3.2±0.13 cm 96.23% Bacillus 径的预计值为 ，实际值达到 ，与推理值相符性达到 ， velezensis strain CL 产抑菌活性物质抑菌活性较原发酵培养基提高了52.38%。 抑菌活性物质特性试验： Bacillus velezensis strain CL 4 37 温度稳定性： 所产抑菌活性物质在 ℃与 ℃处理时，其 90% -20 56% 抑菌活性保持率可以达到 以上，经 ℃处理其抑菌活性保持率明显降低，只有 的抑菌活性，而经55℃处理后抑菌活性保持率降至38%，一旦超过80℃将完全丧失抑菌 活性。 pH Bacillus velezensis strain CL pH2-8 稳定性： 的抑菌活性物质分别经 条件下都能保持 稳定，其抑菌活性保持率都能达到85%以上，而在pH10 的条件下处理10h，其抑菌活性 有所降低，降至56%。 光辐射：Bacillus velezensis strain CL 所产的抑菌活性物质在紫外稳定性并不强，当紫 外照射剂量达到54 K，Bacillus velezensis strain CL 抑菌活性保持率降低到32%；Bacillus velezensis strain CL 的抑菌活性物质具有稳定的光照稳定性，在光照条件下照射 10 d Bacillus velezensis strain CL 的抑菌活性保持率始终保持在98%以上。 遗传性能：Bacillus velezensis strain CL 的遗传性能相当稳定，连续传8代其所产的抑 黄曲霉菌的能力没有下降，其抑菌活性保持率始终在99%以上。 Bacillus velezensis strain CL CL 抑菌活性物质的组分分析，