天然与发酵培养冬虫夏草中核苷类成分的含量及其变化.docVIP

天然与发酵培养冬虫夏草屮核苛类成分的含量及其变化 李绍平，李萍，季晖，张平，董婷霞，詹华强 （ 安徽医科大学附属页院药剂科，安徽合肥 ； 中国药科大学生药教研室，江苏南京 ； 香港科技大学生物技术硏究所，香港九龙） 摘要：目的 比较天然和人工培养冬虫夏草中核昔类成分的含量，并考察其变化。方法用高效毛细管电泳法 测定天然和人工冬虫夏草屮核昔类成分的含最：考察湿热对冬虫夏草中核昔类成分含最的影响。结果人丁冬虫 夏草的核甘含最明显高于天然冬虫夏草；新采集的天然冬虫夏草屮核甘类物质含最极低，而采集日久者核甘类成分 含量较高：湿热可明显增加天然冬虫夏草中核昔类物质的含量,但对人工冬虫夏草中核昔类成分的含量无明显影 响结论天然和人工冬虫夏草屮核昔类成分存在一定差异，天然冬虫夏草屮核昔类物质可能主要来源于大分子 核昔（酸）的降解。 关键词：冬虫夏草；核昔；腺昔：鸟昔；尿昔 中图分类号： ； ； 文献标识码： 文章编号： （） 冬虫夏草（ ）是…种名贵的强 壮滋补屮药，由于自然条件的限制，来源紧缺、价格 昂贵，现多采用人T深层发酵培养虫草菌丝体，以 满足市场的需求。核廿类物质（腺甘、尿廿、鸟廿） 经屮国药科大学生药学教研室李萍教授鉴定，凭证 标木存放于屮国药科大学生药教研室。 产品，氢氧化钠，无水乙醇, 公司。 硼酸为 为腺廿，尿廿，鸟廿均购白 ( ( ) ( ) ( ) , ( ( ) , ( ( ) , () () , ( )( ) 电泳条件熔融石英毛细管（,有效长度 ）；紫外检测器，检测波长 冬虫夏草有效成分Z—,尤以腺甘具有明显的药理 作用，如改善心脑血液循环］、防止心律失常］、抑 制神经递质释放和调节腺昔酸环化酶活性［〕等。 腺廿已被用作冬虫夏草的质控指标［J,人工虫草的 含量高于天然虫草［ ,］。冬虫夏顿I腺廿等核廿类 物质的俞需准砌雀券采屈者样品谕测理繁杂。木文采 用毛细管电泳法测定天然和人工冬虫夏草中腺廿、 尿廿和鸟廿等种核廿类成分的含量，并对其变化 进行了考察。 材米斗与方法 仪器 / 高效毛细 管电泳仪； 电动离心机； 离心机。 试药与试剂 所用实验材料见表，原药材均 收稿日期： 作者简介：李绍平，男，陳士，主管药师 :（） , :（） ? ■ 本文曾李里［%与岸会F第五届青年药学科技工作者最新科研成 果学术交流囚F淀芻霰三等奖 :i|行缓冲液 微孔滤膜过滤）为 +（经硼酸氢氧化钠缓冲液（ ）；柱温 为 ；分离电压 ，极性为正极到负极；压力 进样，进样压力为 ，时间为。每次进样 TOC \o 1-5 \h \z 前，先用 + 氢氧化钠液冲洗 ，再用运 行缓冲液冲洗 。 标准曲线的制备精密称取腺甘、尿廿、鸟甘各 约 ，溶于水中，然后定容至 ， 依次倍比稀释分别得 ， ， ， ， , , 和 + 系列浓度的标准 液，自动压力 ）进样，记录各自峰面积。 然和人工冬虫夏草代表性毛细管电泳图谱见图。 uli含景测定天然和人工冬虫夏草屮核昔类成分含量测定结 果见表。攻烽面积为纵坐标，浓度为横坐标进行冋归，得冋归 方程（表）。 然和人工冬虫夏草代表性毛细管电泳图谱见图。 uli 含景测定天然和人工冬虫夏草屮核昔类成分含量测定结 果见表。 + + + + + + ( )( )( ) ( ) , ( ) )) 样品液的制备分别准确称取天然与人工冬虫 夏草药粉份，每份 置于 提取器屮提 取，提取液水浴蒸干， 水溶解后定容。溶 液用 微孔滤膜（ ， ,）过滤，滤液用毛细管电泳法测定含量。 样品测定取+样品液的制备+项下的样品液， H动压力（）进样，测定腺廿、鸟廿和尿廿 的峰面积，代入标准曲线计算含量。 湿热对冬虫夏草屮腺廿等核廿类物质含量的影 响分别取 干燥至恒重的青海、西藏产天然冬 虫夏草和万丰人工虫草菌粉，每个样品分成 份， 每份 ，分别置于小平皿屮，于相对湿度为 ,温度为的白动恒温恒湿箱屮放置，， 和 ，每个样品于各时间点取岀 份，分别按上法 提取和测定腺廿、鸟廿及尿廿的含量。 结果和讨论 , 毛细管电泳 （） 用迁万移方时数间据和标准加入法鉴定样品色谱 峰，天 实验结果表明：天然和人工冬虫夏草屮腺廿、鸟 廿和尿廿种核廿均以尿廿的含量最高，人工冬虫 夏草的核廿含量明显高于天然冬虫夏草，这可能与 人工培养品的代谢迅速冇关。人工冬虫夏草屮腺廿 的含量差异显著，高低相差达倍（力丰 / 辽宁/ ） 0值得注意的是新鲜采集 的天然冬虫夏草（如青海玉树、涅屮和云南产的冬虫 夏草）屮腺廿等核廿类物质的含量极低甚至无法定 量，而采集口久者核廿类成分含量却较高，提示天然 冬虫夏草小的核廿类物质可能来源于贮存过程屮大 分子核廿（酸）等的降解，为此我们考察了湿热对冬 虫夏草屮核廿类物质含量的影响。 湿热对冬虫夏草中腺廿等核廿类物质含量的影 响 天然