试验三影响血液凝固的因素红细胞脆性的测定血红蛋白的测定1精选文档.ppt

影响血液凝固的因素 1 实验目的 以凝血时间为指标，了解影响凝血的因素，加深 对生理止血过程的理解。 2 实验原理 血液凝固是一个酶解激活过程，有多种凝血因子 参与。根据凝血过程起动时凝血因子来源不同，可将 凝血分为内源性激活途径和外源性激活途径。 3 实验对象： 家兔 4 方法与步骤 4.1 家兔的麻醉、保定与手术 33% 乙醇溶液， 6mL/kg ，耳缘静脉注射。 4.2 颈动脉采血 4.3 试管准备 4.4 记录凝血时间 5 实验结果 表 1 血液凝固及其影响因素 试管号 实验处理 凝血时间（秒） 1 2 3 4 5 6 7 空白 液体石蜡 4 滴 棉花少许 冰水环境 肝素 4 滴 草酸钾 4 滴 脑组织浸液 4 滴 5 号管加 CaCl 2 4 滴 6 号管加 CaCl 2 4 滴 6 注意事项 6.1 采血过程要尽量快，以减少计时误差，对 比实验的采血时间要紧接着进行。 6.2 每支试管口径大小及采血量要相对一致， 不可相差太大。 6.3 判断凝血的标准要一致，一般以倾斜试管 达 45 °时试管内血液不见流动为准。 红细胞脆性的测定 1 实验目的 学习测定红细胞渗透脆性的方法，理解细胞外液 渗透张力对维持细胞正常形态与功能的重要性。 2 实验原理 正常红细胞悬浮于等渗的血浆中，著置于高渗溶 液内，则红细胞会因失水而皱缩；反之，置于低渗溶 液内，则水进入红细胞，使红细胞膨胀。如环境渗透 压继续下降，红细胞会因继续膨胀而破裂，释放血红 蛋白，称之为溶血。红细胞膜对低渗溶液有一定的抵 抗力，这一特征称为红细胞的渗透脆性。 3 实验对象： 动物种类不限 4 方法与步骤 4.1 溶液配置 表 2 不同浓度 NaCl 溶液配制 管 号 1 2 3 4 5 6 7 8 1%NaCl （ mL ） 蒸馏水 (mL) 9 10 9.0 6.5 6.0 5.5 5.0 4.5 4.0 3.5 3.0 2.5 1.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0 6.5 7.0 7.5 NaCl 浓度 0.90 0.65 0.60 0.55 0.50 0.45 0.40 0.35 0.30 0.25 （ % ） 4.2 制备抗凝血：柠檬酸钠作抗凝剂。 4.3 加抗凝血：每只试管加 1 滴。 4.4 观察结果 ①未溶血试管：液体下层有大量红细胞下沉，上层为 无色透明，表明无红细胞破裂。 ②不完全溶血试管：液体下层有红细胞下沉，上层出 现透明淡红色，表明部分红细胞已经破裂，称为不 完全溶血。 ②完全溶血试管：液体完全变成透明红色，管底无红 细胞下沉。 5 实验结果 表 2 家兔 Hb 含量及 RBC 脆性测定 分组 Hb 测定 （ g/L ） RBC 脆性测定（ NaCl% ） 最小抵抗力 最大抵抗力 实验组 对照组 123 0.60 ～ 0.55 0.40 ～ 0.35 6 注意事项 6.1 试管要干净； 6.2 配液要准确； 6.3 加血量要一致； 6.4 轻轻混匀，减少溶血机会； 6.5 静置时间不少于 30min 。 血红蛋白的测定 1 实验目的 掌握比色法测定动物血红蛋白含量的方法。 2 实验原理 血红蛋白的颜色与氧结合量有关，当用一定的氧 化剂将其氧化时，可使其转变为稳定、棕色的高铁血 红蛋白，而且颜色与血红蛋白的浓度成正比。因此， 可与标准色板进行对比，求出血红蛋白的浓度，即每 升血液中含血红蛋白的克数（ g.L -1 ）。 3 实验对象： 动物种类不限 4 方法与步骤： 使用沙里氏血红蛋白计测定。 比色法是用 HCl 使血红蛋白酸化形成粽色的高铁 血红蛋白，然后和标准比色板进行比色。 （ 1 ）血红蛋白计由标准比色箱和测定管组成。测定管 两侧有刻度，一侧为血红蛋白量的绝对值，以每 100 mL 血液中所含血红蛋白的克数表示；另一侧为相对 值，以％（即相