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《临床生物化学与检验》 实验教学大纲 ( 供检验医学专业本科教学使用 ) 蚌埠医学院 生物化学与分子生物学教研室制定 二 OO 八年八月 蚌埠医学院 《临床生物化学与检验》课程实验教学大纲 课程编号： 课程名称： 临床生物化学与检验 英文名称： Clinical Biochemistry and Techniques of Biochemistry 课程性质： 专业主干课程 适用专业： 医学检验本科 考核方式： 日常考核、操作考核、提交实验结果。实验成绩的构成是由实验报告成绩、平时 成绩、实验考核成绩三部分组成。实验总成绩 40 分，其中实验报告成绩 15 分、平时成 绩 10 分、实验考核成绩 15 分。 课程简介： 本课程是医学检验专业本科生的必修课程， 临床生物化学和生物化学检验是由生 物化学、 分析化学、 临床医学等学科交叉融合而形成边缘学科， 是临床医学的不可分割 的重要组成部分， 是医学检验专业学生的主干课程之一。 临床生物化学和生物化学检验 着重阐述了人体疾病发病机制中的生物化学改变， 临床生物化学检验方法的原理、 方法 学评价、检测结果的临床意义和如何按循证医学要求合理选择相关检验指标。 教学大纲要求总学时 162 学时，其中理论教学 68 学时、 实验教学 68 学时，实验教 学共 15 实验类别，共计 26 个实验。 选用教材： 钱士匀 . 主编 . 临床生物化学与检验实验指导 . 人民卫生出版社，第三版 .2007. 实验一 生化实验要求、电教 一、类别： 示教性实验 二、实验目的和要求： 【掌握】 正确使用玻璃器材。包括：⑴认识玻璃器材。⑵掌握玻璃器材的分类。⑶掌握玻璃器材的正确使用方法。⑷掌握玻璃器材的正确清洗方法。⑸了解玻璃器材的校准方法。 正确使用各种加样器。 【熟悉】 1.实验室的规则。 2.药品和试剂的分级和使用原则。 【了解】检验科临床生化室的基本操作流程及实验室规则。 三、实验内容： 1．介绍实验室的一般规则，包括实验秩序、药品和试剂使用规则。 2．发实验器材。 3．观看电教，熟悉相关器材与仪器的正确使用。 四、学时： 4 学时 五、主要仪器设备： 电视机、放像机、可调微量加样器等。 2 六、实验中注意事项： 1．观看电教片时，注意记录电教中的要点。 2．认真观察授课教师的示教内容。 3．遵守课堂纪律，熟悉实验室规则。 ．注意操作时试剂的加入顺序。 实验二 血清蛋白质测定 一、类别： 设计性实验 二、实验目的和要求： 【掌握】 1．双缩脲法测定血清蛋白质含量的原理和方法。 2．溴甲酚绿法测定血清清蛋白的原理和方法。 3．醋酸纤维素薄膜电泳法分离血清蛋白质的原理、操作步骤、实验结果的分析及注意事项。 【熟悉】 1．双缩脲法测定血清蛋白质含量的注意事项及临床意义。 2．溴甲酚绿法测定血清清蛋白的注意事项及临床意义。 3．琼脂糖凝胶电泳法分离血清蛋白质的原理及操作步骤。 4．血清蛋白电泳的临床意义。 5．蛋白质测定的各种方法的原理及评价。 【了解】 1．血清中其它蛋白质的测定原理。 2．聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白质的原理。 三、实验内容： 1．介绍双缩脲法测定血清总蛋白质含量的原理、操作方法及注意事项等内容。 2．介绍溴甲酚绿法测定血清清蛋白的原理、操作方法及注意事项等内容。 3．介绍蛋白质测定的各种方法的原理及评价。 4．介绍醋酸纤维素薄膜电泳法分离血清蛋白质的原理、操作步骤、实验结果的分析及 注意事项。 5．介绍琼脂糖凝胶电泳法分离血清蛋白质的原理及操作步骤。 6．学生按操作步骤进行实验，并对结果进行分析。 四、学时： 8 学时 五、主要仪器设备 ：水浴箱、分光光度计、离心机、微量加样器及电泳仪、电泳槽等。 六、实验中注意事项： （一）双缩脲法测定血清总蛋白质试验的注意事项： 1．黄疸血清、严重溶血；葡萄糖、酚酞及溴磺酞钠对测定血清总蛋白有明显干扰，需用 标本空白管来消除。 2．高脂血症混浊血清会干扰双缩脲法测定血清总蛋白的比色， 可采用下述方法消除： 取 3 2 支带塞试管或离心管，各加待测血清 0.1ml ，再加蒸馏水 0.5ml 和丙酮 10ml，塞紧 并颠倒混匀 10 次后离心，倾去上清液，将试管倒立于滤纸上吸去残余液体。向沉淀 中分别加入双缩脲试剂及双缩脲空白试剂，再进行与上述相同的其他操作和计算。 （二）溴甲酚绿法测定血清清蛋白试验的注意事项： 1． BCG是一种 pH 指示剂，变色域为 pH3.8( 显黄色 ) ～5.4( 显蓝绿色 ) ，因此控制反应液 的 pH 是溴甲酚绿法测定血清清蛋白的关键。 2．配制 BCG试剂也可用其他缓冲液如枸橼酸盐或乳酸盐缓冲液。 但以琥珀酸盐缓冲液的 校正曲线通过原点，线性好，灵敏度高，成为首选推荐配方。 3．当 60g/L 的白蛋