2021枯草芽胞杆菌染色剂.pptVIP

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三、实验器材 菌种 : 枯草芽胞杆菌 染色剂: 5 %孔雀绿水溶液, 0.5 %沙黄 ( 石炭 酸番红 ) 水溶液 其他:小试管、滴管、烧杯、试管夹、载玻 片、显微镜等 四、实验步骤: 1. 制片 : 制备菌涂片、干燥及固定 2. 加热染色 : 向载玻片滴加数滴 5% 孔雀绿染液覆盖 涂菌部位 , 用夹子夹住载玻片在微火上加热至染液 冒汽并维持 5min, 及时补充染液 , 切勿让涂片干涸。 3. 脱色 : 水洗脱色至水流无色为止。 4. 复染 : 沙黄( 0.5% 番红 ) 复染 2 - 3min 。 5. 水洗:水洗无色为止。 6. 镜检将载玻片晾干后油镜镜检。 注意:菌液要浓 枯草芽胞杆菌 巨大芽 胞 杆菌 破伤风梭状芽 胞 杆菌 破伤风梭状芽 胞 杆菌 肉毒梭菌 炭疽杆菌 五、实验结果与分析 1. 绘制观察到的枯草芽胞杆菌形态视野图, 并注明放大倍数。 2. 进行实验结果分析 实验六 霉菌的形态观察 一、实验目的 学习并掌握观察霉菌形态的基本方法 了解四类常见霉菌的基本形态特征 二、实验原理 ? 霉菌可产生分枝或不分枝的菌丝体,分基内菌丝和气生菌丝, 气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝,由繁殖菌丝产 生孢子。霉菌菌丝体(尤其是繁殖菌丝)及孢子的形态特征 是识别不同种类霉菌的重要依据。 ? 观察霉菌的形态有多种方法,常用的有下列三种:直接制片 观察法:是将培养物置于乳酸石炭酸棉蓝染色液中,制成霉 菌制片镜检。载玻片培养观察法:用无菌操作将培养基琼脂 薄层置于载玻片上,接种后盖上盖玻片培养,霉菌即在载玻 片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。培养一定 时间后,将载玻片上的培养物置于显微镜下观察。玻璃培养 观察法:霉菌的玻璃纸培养观察方法与放线菌的玻璃纸培养 观察方法相似 。这种方法用于观察不同生长阶段霉菌的形态, 也可获得良好的效果。 三、实验器材 ? 菌种黑 曲霉 ( Aspergillus sp . ) , 青霉 , 黑根 霉 ( Rhizopus sp . ) 和毛霉( Mucor sp. )培 养 2-5d 的马铃薯琼脂平板培养物。 ? 培养基:土豆琼脂或察氏培养基 ? 溶液或试剂:乳酸石炭酸棉蓝染色液 ? 其他:无菌吸管、平皿、载玻片、盖玻片、显微 镜等 四、实验步骤 直接制片观察法 : 1. 在载玻片上加一滴乳酸石炭酸棉蓝染色液,用解剖 针从霉菌菌落边缘处挑取少量已产孢子的霉菌菌 丝; 2. 先置于 50 %乙醇中浸一下以洗去脱落的孢子,再 放在载玻片上的染液中,用解剖针小心地将菌丝 分散开。 3. 盖上盖玻片,置低倍镜下观察,必要时换高倍镜观 察。 注意:挑菌和制片时要细心,尽可能保持霉菌自然 生长状态;加盖玻片时勿压入气泡,以免影响观 察。菌液要浓 曲霉(分生孢子) 青霉(分生孢子)

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