2021热休克蛋白与疾病.pptVIP

1. 细胞内热休克蛋白 2. 细胞外热休克蛋白 细胞内热休克蛋白与炎性疾病 HSP72 对晚期炎症介质 HMGB1 释放和功能的影响 HSP70 inhibited the cleavage of C23 induced by H 2 O 2 Co-immunoprecipitation and immunoblotting showing the H 2 O 2 -mediated interaction between HSP70 and C23 HSP60/HSP10 ： 1 、 H9C2 细胞 → 腺病毒介导 HSP60/HSP10 基因转染 → 缺氧 → 酶释放 ↓ ，存活率 ↑ （必须两者同时转染 才有效） （ Lau S et al,1997) 2 、腺病毒介导基因转染 → 新生大鼠心肌细胞 HSP60/HSP10 过表达 → 缺氧 - 再给氧 → 保护作用 坏死 ↓ ( 酶释放 ↓ ) 凋亡 ↓ (Cyt C 释放 ↓ ,Caspase- 3↓,DNA 降解 ↓ ) （ Lin KM et al,2001 ） HSP32(heme oxygenase-1, HO-1) 血红素氧合酶是催化血红素分解成胆绿素、胆 红素及 CO 的限速酶。 基因 5 调控区含 HSE ，受 HSF 调控，在氧化应 激时诱导表达。 CO Iron NADP HO-1 Heme Biliverdin （胆绿素） Biliverdin reductase NADPH NADH O 2 NADPH Bilirubin （胆红素） NADP NAD 1 、大鼠心脏 → 缺血 - 再灌 HSP32 表达 ↑ 大鼠 → 血红素注射（ i.p ） 心肌中 HSP32↑ （ 2.8 倍） →I/R→ 梗塞面积 ↓ （如同时给予 HO-1 抑制剂，则保护作用被取消） （ Hangaishi M et al, 2000 ） 2 、小鼠基因敲除模型 → 破坏一个 HO-1 基因 → HO-1 （ +/- ）小鼠 → 离体心 I/R→ 心肌力学恢复差 ， CPK 释放 ↑ ，梗塞面积 ↑ （ Yoshida T et al, 2001 ） 24hr 48hr 小分子 HSP ： 分子量 20 ～ 30kD ： HSP 27/25 αB - 晶状体蛋白（ HSP22 ） αA - 晶状体蛋白 HSP20 MKBP/HSPB 2 HSPB 3 特点： 1 、 C- 末端含有共同的“ α - 晶状体蛋白核心结构域” ； 2 、在横纹肌中表达水平高，与胚胎期横纹肌的分化 关系密切； 3 、与细胞骨架关系密切。 小分子 HSP 的心肌保护研究 1 、大鼠心肌缺血 → HSP27/25 、 αB - 晶状体蛋白及 MKBP 从胞浆向肌原纤维移位，主要分布于闰盘、 Z 线等处 （ Yashida K et al, 1999 ） 2 、大鼠、猪心肌缺血 →αBC 的移位伴随有磷酸化 （ Golenhofen N et al, 1998 ） 3 、 L929 细胞， H 2 O 2 损伤 → HSP27/25 的分子伴娘及细胞保 护作用与其磷酸化状态及细胞中谷胱甘肽水平升高有 关（ Rogalla T et al, 1999; Preville X et al, 1998 ） 可跨膜运转的 αB - 晶状体蛋白工程 蛋白质的制备及其对心肌细胞损伤 的保护作用 pGEX-MTS- α BC pGEX-MTS pF14G GST MTS Factor Xa EcoR I EcoR I EcoR I α BC GST MTS Factor Xa α BC A B 1 2 3 4 5 12 kb 3 2 1.6 1 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 α BC 载体构建 A B 45.7KD 32.5KD 18.4KD 1 2 3 4 5 6 1 2 3 ←GST -MTS- α BC ←GST ←MTS - α BC ←GST -MTS- α BC ←MTS - α BC 78KD A B C C e l l d e a t h r a t e ( % ) L D H r e l e a s e ( % ) * # * # 4 、新生大鼠心肌细胞→腺病毒介导αBC基因转染 →模拟缺血→ CPK 释放↓，微管结构损伤↓ （ Dillmann WH et al, 1999 ） 5 、αBC转基因小鼠→工作心脏→缺血 20min ，再 灌 3 hr→心功能改善，梗塞面积↓，凋亡↓ （ Ray PS et al, 2001 ） 热休克蛋白对心肌细 胞凋亡的影响 α BC HSP60 HSP27 HSP70 O