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肇庆医学高等专科学校 中医学专业教学资源库第二章 抗体与免疫球蛋白第三节 人工制备抗体的类型主讲教师:许名颖第三节 人工制备抗体的类型人工制备抗体的类型一、多克隆抗体二、单克隆抗体三、基因工程抗体AgB1B2B3B4Ag一、多克隆抗体(Polyclonal antibody,PcAb) 概念:多种抗原决定簇刺激机体产生多种抗体的混合物抗原决定簇Ab1Ab2Ab3Ab4天然抗原免疫动物多细胞克隆抗体与抗原结合多克隆抗体优点: 来源广泛、产生抗体缺点:对人有抗原性,可引起过敏;为混合抗体,易出现交叉反应用途:主要用于治疗二、单克隆抗体(Monoclonal antibody, McAb)概念:只针对一种抗原决定簇产生的均一抗体优点: 成分均一、效价高、特异性强应用:抗原检测、疾病诊断和治疗杂交瘤细胞: 骨髓瘤细胞 --- 无限增殖 免疫B细胞 --- 合成、分泌特异性抗体 杂交瘤技术 --- PEG(聚乙二醇) HAT培养基:次黄嘌(H) 氨基蝶呤(A) 胸腺嘧啶核苷(T)抗原B细胞骨 髓 瘤小鼠腹水骨髓瘤细胞脾脏Ab1Ab2Ab3Ab4PEG融合抗血清骨髓瘤细胞被HAT杀死,B细胞逐渐死亡,融合细胞存活HAT培养杂交瘤细胞克隆筛选Ab1Ab2Ab3Ab4Ab1Ab2Ab3Ab4普通抗血清(多克隆抗体)单克隆抗体三、基因工程抗体(genetic engineering antibody)(一)基因工程抗体制备的机理在DNA水平对Ig基因进行切割、拼接或修饰,导入受体细胞表达的抗体导入提取质粒酶切细菌重组酶切提取目的基因标本培养表达抗体(二)基因工程抗体的种类 1. 人-鼠嵌合抗体小鼠抗体V区小鼠抗体V区基因人体抗体C区基因骨髓瘤细胞转染人体抗体C区 2. 重构抗体人体抗体的骨架区人体抗体FR区基因人体抗体C区基因小鼠抗体CDR序列骨髓瘤细胞转染小鼠抗体CDR序列人体抗 体C区 3. 单链抗体VL基因连接肽基因VH基因大肠杆菌转染VLVH连接肽肇庆医学高等专科学校 中医学专业教学资源库谢谢观看主讲教师:许名颖
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