感受态细胞制备流程.pdfVIP

感受态细胞的制备： 1.以1:100 的比例吸取过夜菌液（250ul）加入25ml LB 液体培养基中，37℃，200r/min 振 荡培养2-3h 至OD600 达到0.5 左右（OD600 范围0.4-0.6）。 2.将25ml 菌液移至预冷的50ml 聚丙烯离心管中，在冰上放置30min ，使培养物冷却到0℃。 3.于4℃，以4000rpm 离心10min，回收细胞。 4.倒出培养液，将管倒置1min （于滤纸/吸水纸上），使最后残留的痕量培养液流尽。 5.每50ml 菌液用10ml 预冷的0.1mol/L 的CaCl2 ，重悬每份沉淀，放置于冰浴上30min 。