美国药品分析实验室CGMP的实施和操作 .ppt

测试方法的验证 验证含量测定: 高效液相色谱方法HPLC 强化分解试验(Stress Study): 条件和所需的降解度 调节强化条件,达到5%-10%分解 无需检测物在各种强化条件下都达到5%-10%的分解 至少应有在一种强化条件下的分解 * ppt课件 测试方法的验证 强化分解试验(Stress Study): 加热: 视各原料药的熔点, 不应超过100 °C. 多选用40 °C.和 60 °C. 加热时间不少于24小时. 加热和湿度: 常用条件: 60 °C /75%RH, 40 °C /75%RH. 强化时间 不少于7天. 光照: 按ICH光照条件的要求, 视光照箱辐射能力而定时间. 达到1.2X10 6 Lux 小时或紫外光200瓦小时/平方米的条件 * ppt课件 测试方法的验证 强化分解试验(Stress Study): 氧化: 采用 1% -3% H2O2, 在30 °C, 1-24 小时 酸性水解: 可用 0.01N - 0.1N HCl, 在30 °C , 时间视分解程度而异. 碱性水解: 可用 0.01N-0.1N NaOH, 在30 °C , 时间视分解程度而异. 经过酸性或碱性水解后的样品, 需经过中和后再进行色谱分析. * ppt课件 测试方法的验证 分析强化分解的样品 用测试含量和杂质的方法分析同一条件下的分解样品. 检验其方法的选择性,准确性和精确性, 计算含量的降低与所产生的降解产物量是否收支平衡(Mass balance) 列表来总结这些分解样品的测试结果 可接受的收支平衡范围, 如果未能达到,如何进行研究和讨论 * ppt课件 测试方法的验证 分析强化分解样品的纯度(Purity) 证实原料药的峰不含其他杂质 必须使用光电子二极管阵列监测器 (PDA, Photodiode Array Detector)分析含量和杂质图谱中的原料药峰 使用光谱特定的软件来计算, Chemstation using Purity and match factor Empower, use a factor 将数据列表, 归纳并作出结论 * ppt课件 测试方法的验证 标样和样品溶液稳定性(Sample Stability) 为在测试方法中的信息提供证据 标样溶液稳定性 第一天, 第二天….第N天, 可接受的标准: 99.0%-101.0% 样品溶液稳定性 第一天, 第二天….第N天, 可接受的标准: 原料药为99.0%-101.0% 成品药为98.0%-102.0% 将数据列表,归纳并作出结论. 这结论也写入分析方法中. 注意室温的定义与所在地区的联系 应充分利用HPLC样盘上的制冷装置 * ppt课件 测试方法的验证 杂质检测方法的验证 除了需验证含量检测方法的所有项目外, 定量限度(Limit of Quantitation) 在其最低浓度时, 检测物可被准确的,重复的和定量的检测到. 原料药: 0.05%, RSD; NMT 10% 成品药: 0.08% - 0.10%, RSD; NMT 10% 现多用必须报告的限度(Reporting Threshold) * ppt课件 测试方法的验证 如何计算必须报告的限度(Reporting Threshold)? 按ICH指导文件, 如果此药每天最大剂量中的原料药低于或等于1克时, 其必须报告的限度(Reporting Threshold)是0.1%. 任何杂质的含量在0.1%和超过0.1%都必须列出并计入杂质总和. 如果此药每天最大剂量中的原料药 超过 1克时, 其必须报告的限度(Reporting Threshold)是0.05%. (注意必须报告至小数点后两位数) 通常是在分析方法中列出此药必须报告的限度(Reporting Threshold), 但验证方法的定量限度(LOQ)时, 其浓度应低于必须报告的限度浓度. * ppt课件 测试方法的验证 杂质检测方法的验证 检测限度(Limit of Detection) 在其最低浓度时, 检测物可被重复的检测到. 但其含量是不准确的. 按定量限度定义: 信号/躁音(S/N) = 10:1 检测限度的定义: 信号/躁音(S/N) = 3:1, 即检测限度 = 定量限度/3 如果定量限度是0.05%, 那么其检测限度: 0.05% / 3 = 0.017% * ppt课件 测试方法的验证 杂质检测方法的验证 建立已知杂质的计算参数 RRF:Relative Response Factor 或RF: Response Factor 免去每次测试时使用已知杂质的标样. 这些已知杂质的计算参数是通过其杂质线性关糸的斜率和原料药线性关糸的斜率来建立, 但需要核实.