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选修三基础知识识记点 1基因工程的概念:基因工程是在全空水平上进行操作,因此又叫做?^DNA 23456 2 3 4 5 6 78 限制酶来源：主要是从星整址中分离纯化出来的。 限制酶的功能：识别倚定的核昔酸序列，并在倚定位魂切割碑酸二醋K。 限制酶切割的结果：站性末端和平未端。 DNA连接酶功能：恢复被限制酶切开了的两个核昔酸之间的沁三週经。 DNA聚合酶的作用部位是鳞酸二11键。 运载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并植定保存:②具有一至多个胆 剣晦切割位孔供外源DNA片段插入；③具有标畑粧因,供重组DNA的鉴定和 选择。 9基因工程常用的载体有： 质粒.哒菌体 和 动、植物病參 等。 10最早应用的载体是质粒，它是细菌细胞中的一种很小的双链坯挂DNA分子。 11基因的基本操作程序：目的釜因的获車、釜因表达戟体的构建、将目的釜因 导入受体细胞.目的基因的检测与鉴定。基因工程的核心是:基因表达载体的 构理。 逆無录法和化学合成法。③PCR扩增12.获取目的基因的方法是①从自找界中 逆無录法和化学合成法。③PCR扩增 IH13?取原核细胞的目的基因方法一般是： S分离法。获取真核细胞的目的基因 一般是人工合成法。14. PCR是聚合酶链式反应的缩写,是一种在生物体外复制 特定DNA片断的核酸合成技术。PCR原理是：DNA双违复制的原理。前提是: 要有一段已知目的基因的械昔酸序列。PCR条件：模板、ATP、酶、原料（四 种游离的脱氧核昔酸）PCR酶：热稳定DNA聚合酶（耐高温DNA聚合酶） IH 15.即基因表达载体的组成：目的釜因.启动子.终止子、标记釜因 16?标记基因的作用：鉴定受体细胞中是否含有目的基因.从而将含有目的基因 的细胞筛选岀来。基因表达载体构建方法：同种限制晦分别切割载体和目的基 因，再用DNA连接酶把两者连接形成重组质粒。将目的基因导入植物细胞：最 常用方法是农杆菌我化法,其次还有基因枪法和花粉管遇道法。 17.农杆菌转化法原理：①农杆菌能感染双子叶植物和裸子植物.②农杆菌中 的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞,并整合到受体细胞染色体DNA上。 18?将目的基因导入动物细胞：显徴此方法的受体细胞多是獎空?。 19?选受精卵做受体的原因：心r发育的全能性；将目的基因导入微生物细胞： C寸处理法。20?选用微生物作为受体细胞的优点：繁疸快、多为单细胞、遗传 物质相对较少 21 ?将目的基因导入水稻（单子叶植物）方法是：基因枪法或花粉*通道法 目的基因检测与鉴定首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的 基因,方法是采用DNA分子杂交技术。其次还要检测目的基因是否转录出mRNA, 方法是釆用分子杂交技术。最后检测目的基因是否翻译成蛋白质,方法是采用 找原一抗体杂交技术。 有时还需进行个体生鳄学水平的鉴定。如抗虫或抗病的接种实验等。 24?目的基因成功表达的标志：受体细胞通stJ後录、初译合成相应的蛋白质（具 体题目写出具体的蛋白质）；从结构上分析，为什么不同生物的DNA能够连接在一起？①具有共同的 DNA 双如fe结构②同种限制酶切割后茫成的粘性未靖相 同（jMfrftJK端?以碓基宴补配对）;目的基因能在受体细胞中表达的原因!_还 从预期的蛋白质功能出发-设计预期的蛋白质结构（核心步骤）一推测应有 的氨基酸序列?找出相对应的脱氧核昔酸序列（基因）?合成基因?利用基因 工程表达蛋白质 植物体细胞杂交 。 植物体细胞杂交 。动物细胞核移植、_ 动物细胞工程包括哪些技术: 动物细胞培养、 单克隆抗体制备。物细胞融合、 单克隆抗体制备。 植物细胞工程的理论基础（原理）：细胞全能性 全能性表达的难易程度：受精卵〉生殖细胞〉干细胞＞体细胞:植物细胞〉 动物细胞 试管苗一?植物体29?植物组织培养技术过程：离体的植物器官、组织或细胞一（脱分化）―愈 伤组织一（再分化 试管苗一?植物体 30.植物体细胞杂交技术过程： 歸虢甲夏展生质体甲 歸细腕乙?魄展生质体乙蟲屈幽瞰皿伤做再分％种植株31 ?植物体细胞杂交中用到的酶是：评维亲酶和呆胶酶。32?植物体细胞杂交诱导融合的方法：物理法包括押 歸虢甲夏展生质体甲 歸细腕乙?魄展生质体乙 蟲屈幽瞰皿伤做再分％种植株 31 ?植物体细胞杂交中用到的酶是：评维亲酶和呆胶酶。32?植物体细胞杂交诱导融合的方法：物理法包括押J 振动.电刺激等。化学 法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。物体细胞杂交的意义：了杂 交不亲和的障碍。 33?植物组织培养技术：该技术的核心： 脱分化利齐分化（08山东理综） 34.动物细胞培养流程：取动物组织块一剪碎一用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分 散成单个细胞?制成细胞悬液一原代培养?贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或 胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继