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标准
对照定量法
标准对照法依据
—光的吸收定律
当一束平行的单色光通过均匀、无散射的含有吸光性物质的溶液时,在入射光的波长、强度及溶液的温度等条件不变的情况下,该溶液的吸光度A与溶液的浓度c及液层厚度b的乘积成正比,即:
当溶液厚度为一定值时有
A∝ c
标准对照定量法原理
在相同的条件下,配制浓度为cs的标准溶液和浓度为cx的试样溶液,在最大吸收波长处,分别测定二者的吸光度值为As、Ax ,依据朗伯-比尔定律得:
As=csL
Ax=cxL
运用标准对照定量法,测定B12 注射液中维生素B12的浓度(单位ug/mL)
01
配制一个与被测溶液浓度相近的标准溶液:
精密称取对照品25.00mg,加水稀释至1000mL 。
其浓度为cs=25.00*1000/1000=25.00(ug/mL)。
02
根据朗伯-比尔定律,以该物质吸收光谱图中的λmax=361nm为入射光。用1cm吸收池,测其As=0.518
03
精密吸取B12注射液2.50mL,加水稀释至10.00mL将样品溶液推入光路,测其Ax=0.508
04
根据公式计算试样溶液的浓度cx
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