肠球菌属检验.docxVIP

元谋县人民医院 检验科 微生物室 肠球菌属检验标准操作规程 文件编号 生效日期 文件版本 文件页码 2011-11-01 第一版 1/2 1 ?概述 肠球菌属包括粪肠球菌、屎肠球菌、鸟肠球菌、类鸟肠球菌、棉子糖肠球菌等 21个种。 标本类型 血液、尿液、痰、穿刺液、脓液等标本。 鉴定 3.1形态与染色 革兰阳性球菌，单个、成双或短链排列。 3.2培养特性 在血琼脂平板上35C培养18?24小时，形成较小、灰白色，有 ：?溶血或 溶血环的菌落。在康凯琼脂平板上形成较小、干燥、粉红色菌落。 3.3生化反应 触酶试验阴性，分解甘露醇，胆汁七叶苷试验阳性， 在含6.5%NaCI肉汤 中生长，多数菌株 PYR试验阳性，对杆菌肽耐药。 3.4 鉴别要点 3.4.1本菌属特征 革兰阳性球菌，触酶阴性，在含 6.5%NaCI肉汤中生长，胆汁七叶苷 和耐盐试验阳性，45C生长。 3.4.2与链球菌属和乳球菌属的鉴别 肠球菌属能在pH9.6肉汤和45C生长，胆汁七叶甘 和耐盐试验阳性，而链球菌属和乳球菌属则相反。 3.4.3粪肠球菌与屎肠球菌、鸟肠球菌的鉴别 粪肠球菌不分解 L-阿拉伯糖，分解山梨 醇。屎肠球菌能分解 L-阿拉伯糖，不分解山梨醇。鸟肠球菌分解 L-阿拉伯糖和山梨醇。 3.5操作步骤 3.5.1涂片、染色 观察菌落特征，挑取可疑菌落，涂片染色镜检。 3.5.2触酶试验参见《触酶试验标准操作规程》。 3.5.3鉴定从血琼脂平板上挑取纯菌落，用微生物鉴定仪或传统生化反应进行细菌鉴定。 药敏 参见《药物敏感性试验标准操作规程》及 CLSI M100-S19最新版本文件。 质量控制 参见《质量管理程序》。 检验结果解释与分析 在丄内酰胺酶阴性肠球菌中， 氨苄西林药敏试验结果可预测阿莫西林 -克拉维酸、氨苄西 林-舒巴坦、哌拉西林和哌拉西林 -他唑巴坦等敏感性。青霉素药敏试验可预测氨苄西林、阿 莫西林、阿莫西林-克拉维酸、氨苄西林-舒巴坦、哌拉西林和哌拉西林-他唑巴坦等药敏结果。 粪肠球菌中氨苄西林药敏结果可以预测亚胺培南的药敏结果。 对于血培养和脑脊液培养分离 出的肠球菌需做 二内酰胺酶检测，若 二内酰胺酶阳性，则对氨基青霉素、羧基青霉素和脲 基青霉素均耐药。为耐万古霉素肠球菌（ VRE ）加做氯霉素、红霉素、四环素和利福平药敏 试验，根据结果进行治疗。氨基糖苷类高水平耐药株 HLAR可用庆大霉素120」g/ml纸片筛 选，无抑菌环为耐药，抑菌环》 10mm为非HLAR，对于抑菌环在 7-9mm之间的菌株需用 稀释法确认。对于肠球菌属，头孢菌素类、氨基糖苷类（仅筛选高水平耐药性） 、磺胺甲恶 唑、甲氧苄啶和克林霉素在体外可能有活性（敏感） ，但在临床上耐药，所以不能报告肠球 菌对这些药物敏感。 临床意义 粪肠球菌和屎肠球菌主要引起医院感染，最常见为尿道感染（大部分与尿道器械操作、 导尿等有关），其次为腹部和盆腔等部位的创伤和外科术后感染。近年来，肠球菌属氨苄西 元谋县人民医院 检验科 微生物室 肠球菌属检验标准操作规程 文件编号 生效日期 文件版本 文件页码 2011-11-01 第一版 2/2 林耐药菌株和庆大霉素高耐药株逐渐增多， 耐万古霉素的肠球菌国外也有较多报道， 已使肠 球菌所致重症感染的治疗成为临床棘手的问题。 鉴定流程 参考文献 中国合格评定国家认可委员会 .CNAS-GL23:2008医学实验室质量和能力认可准则在临 床微生物学检验领域的指南 .2008 周庭银编著?临床微生物学诊断与图解?第二版?上海：上海科学技术出版社， 2007 叶应妩，王毓三，申子瑜主编 ?全国临床检验操作规程?第3版?南京：东南大学出版社, 2006 Murray PR. Ma nual of Cinical Microbilogy. 9th ed.Washi ngto n:ASM Press,2007 ⑸ISO 15189 : 2007医学实验室-质量和能力认可准则.2007