遗传规律物质的基础.ppt

;微生物遗传学主要内容;遗传规律物质基础;遗传规律物质基础;遗传规律物质基础;遗传规律物质基础;遗传规律物质基础;遗传规律物质基础;遗传规律物质基础;遗传规律物质基础;遗传规律物质基础;遗传规律物质基础;遗传规律物质基础;遗传规律物质基础;遗传规律物质基础;第一章 微生物的遗传物质;第一节 微生物的遗传物质基础是核酸;肺炎链球菌： Streptococcus pneumoniae 肺炎双球菌(Diplococcus pneumoniae) S型: 菌体具荚膜，菌落表面光滑，有致病能力 R型: 菌体无荚膜，菌落表面粗糙，无致病能力;遗传规律??质基础;1944年，O.Avery等精确重复了转化实验， 确定了转化因子 的化学本质是DNA。;遗传规律物质基础;启示：;2、噬菌体感染实验 （Hershey 和 Chase于1952 年）;遗传规律物质基础;35S，标记噬菌体的蛋白质外壳 3H，15N……怎样标记？如何区分？ 一步生长曲线 成熟后自然裂解，人为提前裂解 ;同位素应用实例;6、用放射性同位素、荧光分子等标记的DNA分子做探针，利用DNA分子杂交原理，进行基因诊断和检测病毒含量。7 1952年，Hershey和Chase使用35S和32P双标记噬菌体感染实验证明DNA是遗传信息的载体8 在50年代还利用14C确定了光合作用最初产物是PGA，并提出了卡尔文循环。9 1958年 使用 15N 证明DNA半保留复制10、60年代，使用14C、13C、18O等，发现了植物光呼吸作用。11、1977年，Sanger等采用放射性标记技术和ARG技术，成功地进行了DNA序列测定。;JIN Jian-Ling, HUA Guo-Qiang, MENG Zhen, GAO Pei-Ji. Mechanisms of antibacterial activity of berberine and the reasons for bacteria not resist to it. Chinese Herbal Medicines， 2011,3(1):27-35.;3、植物病毒（tomato mosaic virus）重建实验;遗传规律物质基础;　　信息量大，可以微缩； 　　表面互补，电荷互补；双螺旋结构与精确复制； 　　可以突变以求进化 　　有T无U，基因组得以增大，而无C→U带来的潜在危险 胞嘧啶自发脱氨基的频率约为每个细胞每天190个, 2.9 ×109 　　 ;???传规律物质基础;5　RNA作为遗传物质;第二节　ＤＮＡ结构;二 DNA二级结构;DNA分子构型的多态性;CⅠ蛋白与DNA结合的信号;（二）　DNA的变性与复性;1、?? 变性;?★变性因素 ： 热变性 酸碱变性（pH小于4或大于11） 变性剂（尿素、盐酸胍、甲醛） ★变性后的理化性质 ： 260nm吸收值升高。 粘度降低，浮力密度升高。 二级结构改变，部分失活。 ;★?? 增色效应与减色效应 增色效应：在DNA的变性过程中，摩尔吸光系数增大 减色效应：在DNA的复性过程中，摩尔吸光系数减小; 熔解温度（Tm）： ★DNA的双螺旋结构失去一半时对应的温度。 浓度50ug/mL时，双链DNA A260=1.00，完全变性（单链）A260= 1.37。当A260增加到最大增大值一半时，即1.185时，对应的温度即为Tm。 DNA的Tm一般在82—95℃之间;影响DNA的Tm值的因素;②G-C含量与Tm值成正比。 测定Tm，可推知G-C含量。 G-C%=（Tm-69.3）×2.44;③介质中离子强度 离子强度高，Tm高。 ;２、?? 复性; 影响DNA复性过程的因素 ： ;复性发生的过程; dCt / dt = -KCt2 积分 ;● 不同的DNA Cot ? 是不同的， Cot ?不但与K值有关，也与DNA的复杂性有关； ● K值取决于阳离子浓度、温度、片断大小及DNA分子复杂性； ● 如果将其它因子固定，则K与复杂性X的关系为：：;● 复杂性(X)----DNA中没有重复碱基的排列顺序的数值。 e.g. (A)n, X =1; (AT)n, X =2; (AGC)n, X =3; (AGCT)n, X =4; (AGCTG)n, X =5; ● Cot ? 值可以显示DNA顺序的复杂程度。;遗传规律物质基础; ;遗传规律物质基础;;三　ＤＮＡ三级结构;２　超螺旋对DNA理化性质的影响 变性温度高,　 分子结构较紧密， 黏度较低，浮力密度较大， 沉降速度较快，电泳速度较快 应