动物组织基因组的提取概要.pptVIP

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  • 2021-03-14 发布于广东
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8)加入500 μl Wash buffer B,12,000 rpm 离心30 s-1 min,弃废液。 9)再次12,000 rpm 离心2 min,将离心柱置于新的离心管中,并打开离心柱盖,于室温或37℃恒温箱放置5~10 min,直至无明显乙醇味。 10)在硅基质膜中央加入50-200 μl TE buffer(事先预热55-65℃),置于室温2-5 min,12,000rpm 离心30 s。 11)离心得到的溶液再次加入离心柱中,室温放置2min, 12,000 rpm 离心2 min。所得的溶液为纯化后的基因组DNA。 称取肝脏0.5g 冰冷的生理盐水清洗(3次) 剪碎 5ml生理盐水 匀浆 各组取1/10组织细胞液 移至1.5ml离心管 加600ul Lysis Buffer 加20ul RNase A 颠倒混匀, 放置5min 加10ul Proteinase K 混匀 56℃水浴,45min 颠倒混匀数次 至液体变清亮 及粘稠 12000rpm,10min 离心 取上清转入新离心管 加800ul无水乙醇 混匀 转入离心柱 可分次转入 12000rpm,1min 离心 弃废液,加入 700ul Wash buffer A 12000rpm,1min 离心 弃废液,加入 700ul Wash buffer B 12000rpm,1min 离心 弃废液,加入

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