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二、蛋白质分离纯化的一般原则 （一）分离对象的检测 应该能“看到”和“识别”要分离得到的蛋白质，或是从它的分子质量加以“识别”，或是通过特征的吸收光谱“看到”它们，最重要的是从它的生物活性上加以“识别”。 (二）分离方法的分类和选择、组合和优化 如果原料充足，可以用盐析之类以溶解度为基础的分离方法，超滤也可以作为首选的方法。 在选择所用的方法时，应该尽可能地选用不同原理的分离方法，并加以组合；或选用类似的方法，但是要改变分离条件。通常以电荷为基础的分离方法与以分子质量为基础的方法组合后，就可以得到满意的结果。 在各类方法组合和优化时，经常首选的方法是亲和层析。因为该方法可以将不具所需样品活性的其他蛋白质一次性从亲和层析步骤中分离除去。 第二章 第一节蛋白质的功能 一、作为信息分子和信号的转导分子 （一）作为信号的蛋白质 作为信号分子的蛋白质包括激素、生长因子、细胞因子等。 它们的共同特征是：作为特异的配体，作用于细胞表面的受体，进而通过细胞的各种信号转导途径，最终作用与基因，引起某些蛋白质的表达。 其结果或是促进某些细胞增殖，或是对机体的整体平衡进行调节，或是对外来刺激作出应答。 属于激素类型的蛋白质有胰岛素、生长激素等。 属于生长因子类的蛋白质有表皮生长因子、成纤维细胞生长因子、促红细胞生长素等。 细胞因子中的绝大多数参与细胞免疫调节，实际上，也与机体的防卫有关。它们中最常见的有白细胞介素、干扰素、肿瘤坏死因子等。 （二）起信号转导作用的蛋白质 目前普遍认为信号转导过程存在与细胞中，信号的最终转导者是细胞膜上的受体。 细胞外各种各样的信号分子，首先是与其在细胞表面的特异的受体结合，将信息从细胞外转导到细胞内；然后引发细胞内的信号转导。 在细胞质内的信号转导途径不是单一的，而是呈网络状。各种类型的激酶是细胞质中信号转导的主导者。 （三）各种类型的转录因子 信号转导犹如接力过程，其间最后一棒是转录因子。一旦信号转导过程激活了转录因子，后者将作用于基因，诱导基因的表达。 如果从狭义的角度看，更多的蛋白质都可以归属于信息分子。因为几乎所有的蛋白质在行使功能时都具有其特定的专一性，这种专一的相互作用就蕴藏着某种信息。 二、具有催化和转化功能 酶分子是生物化学变化和转化的直接参与者和主导者。通过在酶作用下的氧化还原、基团转运、异构、水解、裂合和连接6种机制，完成物质/分子的转化、降解、合成和修饰。最终导致机体在特定的时刻，特定的场所，生产出所需的物质/分子。 三、分子和物质的运载体 各种物质和分子在机体中除了被改变和转化外，还在机体中被储存或转运。物质/分子流动可以有多种不同的方式。以物质通过细胞质膜的方式为例，有自由扩散、被动运送和主动转送3种方式。 载体蛋白质（carrier proteins） 就是一类行使主动转运功能的蛋白质的总称。它们在机体中起到运载和转运其他分子的作用。 载体蛋白质的广泛存在，有以下几个原因： 1．各种分子的属性不同，它们要在不相容的 环境中转运，必须借助载体蛋白。 2．在机体内有些分子的转运或有方向性，或 有靶向性，或有选择性，则需专一、特异 的载体蛋白质介导。 （一）血浆中的各种运输蛋白 在体液中存在着多种多样的载体蛋白质。有些运载金属离子，如转铁蛋白；大量的是转运水不溶的非极性分子，如视黄质/甲状腺素运载蛋白、维生素D结合蛋白等；也有专一性很差的、和碱性药物均可结合的α1酸性糖蛋白，以及和各种疏水分子结合的血清白蛋白。 （二）质膜中的运输蛋白 细胞质膜中的载体蛋白质的功能和体液中的载体蛋白质相仿，只是运载的对象不同。它们将亲水的或带电的极性分子顺利地输送通过疏水的脂双层。细胞质膜上的载体蛋白质是细胞膜的重要组成部分，它们为细胞源源不断地输入生长必需的物质，如氨基酸、单糖、乃至于水。 （三）细胞内的运载蛋白质 在细胞内也存在着多种特定的载体蛋白质，它们分别将与其特异结合的分子转运到细胞内特定的部位和细胞器中。 四、结构和支撑功能 所有生物体，即使是原始的单细胞生物，乃至于最小的病毒，它们之所以能存在，均离不开一些结构和支撑的物质。最重要的支撑物质之一是脂质，它们在水的世界中，形成有形的颗粒。但是细胞质膜中的脂质还是不够的。在细菌和真菌等微生物，以及植物细胞表面都有糖类组成的细胞壁。另外，蛋白质在生物体和动物细胞的形态维持和结构支撑中，同样起到重要作用。 五、蛋白质的运动和动力功能 生物体是活体。因此，机体和细胞的运动是绝对重要的。机体和细胞运动一方面需要能量，另一方面又离不开实施运动的物质。蛋白质也是实施运动的主体。 肌肉蛋白是机体中负责运动的主要蛋白质。 另一类与运动和动力有关的蛋白质是动力蛋白，也称马达蛋白。它们的功能是负载着一些分子在特定的结构上运动。 六、防卫和保护功能 （一）毒