第三讲抗菌肽.ppt

* 2021/3/13 二、防御素的分布 早在20世纪60年代,当人们研究豚鼠白细胞的抗菌活性时,就对多肽产生了兴趣,因为在白细胞中富含这种物质且具有广谱抗菌的活性; 当人们在人白细胞中发现抗菌肽后,发现这种物质的分布很广泛,其由上皮细胞产生并对宿主具有防御作用。在已经研究过的哺乳动物以及小鸡和火鸡中,都发现有典型的防御素多肽。从蛇毒也已分离到防御素类多肽（生长捕集多肽,growth arresting peptide和响尾蛇胺,crotamines）,其可能作为一种上皮宿主防御多肽,以抵御更大的捕食者。 * 2021/3/13 三、微生物对防御素的耐受性 通过插入诱变的方法,已经鉴定了一些细菌对防御素产生耐受性的特异性机制。破坏phoP-phoQ双组分转录调节子,能够增加沙门菌对防御素和其他阳离子多肽的敏感性。 * 2021/3/13 四、防御素的其他生物活性 防御素还具有许多其他生理活性,如对单核细胞、T-淋巴细胞和树突细胞的趋化活性（chemotactic activity）; 人源的β-防御素1和2,具有吸引记忆T-细胞和未成熟树突细胞,这种化学吸引剂的作用可能是由于防御素与细胞因子受体CCR6结合的缘故。尽管这一生理学意义还没有被了解,但在发炎的皮肤中高浓度的HBD-2（人源β-防御素2）使防御素有可能与天然的细胞因子配体竞争。 * 2021/3/13 四、防御素的其他生物活性 某些被称之为皮质激素抑制剂（corticostatins）的防御素,通过与促肾脏腺皮质激素受体（adrenocorticotropic hormone,ACTH）的非活化结合,达到相反的效果; 尽管这种活性将抑制免疫抑制性激素可的松的产生,但对感染是有用的。另有报道称某些防御素在纳摩尔浓度下,对哺乳细胞具有活化硝苯吡啶敏感的钙通道。也有报道称某些与防御素遗传和结构相似的多肽,已经在雄性生殖道,特别是副睾中发现。 * 2021/3/13 第三节 Cathelicidins抗菌肽家族的研究进展 一、Cathelicidins基因组成和生物合成 20世纪90年代,在进行bactenecin5 cDNA的克隆时发现cathelicidins抗菌肽具有共同的结构特征,即N末端都含有一个cathelin区域（一个来自猪白细胞的大小约12kDa的蛋白）,所以在1995年将其命名为cathelicidins家族。研究证明cathelicidins基因有4个外显子和3个内含子 。 * 2021/3/13 Cathelicidins的基因组成 * 2021/3/13 二、Cathelicidins抗菌肽家族的结构特征 根据不同cathelicidins抗菌肽氨基酸的组成和在特定环境中的空间结构特征,可将其分为4类,即α-螺旋、伸展螺旋、β-片层和环状结构抗菌肽。 * 2021/3/13 * 2021/3/13 用Shiffer-Edmundson的车轮投影模型表示PMAP-36 和LL-37的α－螺旋多肽结构 * 2021/3/13 （一）α－螺旋cathelicidins抗菌肽的抗菌活性 α－螺旋cathelicidins抗菌肽的抗菌谱广,既抗革兰阳性菌,又抗革兰阴性菌,还抗许多耐药菌,如耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、耐万古霉素肠球菌、多重耐药菌铜绿假单胞菌、大肠埃希菌包膜和非包膜菌株,以及肺炎克雷伯氏菌等。 人LL-37的抗菌活性比人嗜中性白细胞肽1（ 一种α－防御肽）还强,可以抗铜绿假单胞菌和嗜麦芽糖寡养单胞菌等许多菌。 * 2021/3/13 （一）α－螺旋cathelicidins抗菌肽的抗菌活性 带有疏水性C末端的α-螺旋cathelicidins还具有抗真菌的活性;它们抗真菌的MIC值与抗细菌的相同或略高。 包括敏感性真菌白念珠菌（Candida albicans）和从免疫抑制病人中分离得到的Cryptococcus neoformans。 α-螺旋cathelicidins抗菌肽以剂量依赖型方式,在MIC浓度时可迅速穿透敏感微生物的生物膜或人工膜,提高细菌细胞膜的通透性,从而导致细胞死亡。 * 2021/3/13 （一）α－螺旋cathelicidins抗菌肽的抗菌活性 缺少疏水区域的BMAP-27、BMAP-28和LL-37/hCAP18的合成片段,能够使其选择性提高和对真核细胞毒性降低,但仍保持抗菌活性。 当BMAP-28的C端高度疏水性残基被一些亲水性残基替代后,对哺乳动物细胞的毒性极大降低,且对革兰阴性菌的活性提高,而对革兰阳性菌的活性降低。 * 2021/3/13 （一）α－螺旋cathelicidins抗菌肽的抗菌活性 体内研究表明CAP18抗菌肽可能被用来治疗革兰阴性菌引起的败血症(G-