2.2.1动物细胞培养(第一课时).pptVIP

5.怎样将动物组织分散成单个的细胞? 6.胰蛋白酶的作用是什么呢?细胞间隙主要含有什么物质成份? 7.为何要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离下来? 8.细胞贴壁生长对培养容器有何要求? 用剪刀剪碎组织,再用胰蛋白酶处理。 胰蛋白酶将动物组织细胞间隙中的蛋白质分解,使细胞分散开。 当贴壁细胞生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖—细胞出现接触抑制。 培养瓶的内表面要光滑、无毒、易于贴附。 9.什么是原代培养与传代培养? 10.动物细胞培养液的主要成分是什么? 将动物组织消化后的初次培养就是原代培养。 当原代培养的细胞贴满瓶壁后,用胰蛋白酶处理,制成细胞悬浮液后再次分瓶继续培养就是传代培 养。 通常含有葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、动物血清等。 2021/3/14 * 离体的植物组织或细胞在适宜的条件下可发育成完整的植株,那么我们是否可以利用类似的方法,使动物细胞发育成一个完整的个体呢? 例如:能否用高产奶牛的耳细胞,培育出高产奶牛呢? 2021/3/14 * 分 类 胚胎细胞核移植： 体细胞核移植： 细胞分化程度低，恢复全能性容易 细胞分化程度高，恢复全能性不容易 二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 (一)动物细胞核移植概念 将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。 用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。 2021/3/14 * 结合图2-21,阅读P47-50 1.卵母细胞从哪来? 2.如何去除细胞核? 3.对供体牛有何要求? 4.克隆动物的过程中实际有哪些技术支持? 5.克隆牛的性别和主要性状与哪头牛相同? 2021/3/14 * 回忆克隆羊“多莉”的培育过程 卵细胞 Ａ母绵羊 Ｂ母绵羊 乳腺细胞 核移植 早期胚胎 卵裂 C母绵羊子宫 胚胎移植 多莉羊 分娩 妊娠 融合后的卵细胞 2021/3/14 * （ MⅡ卵母细胞） 减数第二次分裂中期 将供体细胞注入去核卵母细胞 核移植 胚胎移植 供体细胞培养 (二)体细胞核移植的过程 1.对比多莉羊和课本高产奶牛的克隆过程,找出操作过程的不同点? 2.核移植的受体细胞是什么?处在什么时期?用此细胞作为受体细胞有什么好处? MⅡ中期卵母细胞 卵母细胞体积大,便于操作;含有营养物质丰富,提供早期胚胎发育所需的营养;含有激活细胞核体现全能性的物质。 2021/3/14 * P49讨论: 1.在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前,为什么必须先去掉受体卵母细胞的核? 为使核移植的胚胎或动物的遗传物质全部 来自有重要利用价值的动物提供的体细胞。 在供体细胞的细胞核移至受体细胞之前,必须将受体细胞的遗传物质去掉或将其破坏(P49小资料）。 2021/3/14 * 培养的动物细胞一般当传代至10～50代左 右时,部分细胞核型可能会发生变化,其细胞 遗传物质可能会发生突变,而10代以内的细胞 一般能保持正常的二倍体核型。 2.用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞,想一想,这是为什么? 2021/3/14 * 3.你认为用上述体细胞核移植方法生产的克隆动物,是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗?为什么? 绝大部分DNA来自于供体细胞核,但其核外还有 少量的DNA,即线粒体中的DNA是来自于受体卵 母细胞。 此外,即便动物的遗传基础完全相同,但动物的 一些行为、习性的形成与所处环境有很大关系, 核供体动物生活的环境与克隆动物所生活的环境 不会完全相同,其形成的行为、习性也不可能和 核供体动物完全相同,从这一角度看,克隆动物 不会是核供体动物100%的复制。 2021/3/14 * (三)、体细胞核移植技术的应用前景 1.在畜牧业中可以加速家畜遗传改良的进程 2.保护濒危物种 3.医药卫生领域生产医用蛋白质及组织器官的移植 4.了解胚胎发育和 衰老过程;追踪研 究疾病的发展过程 和治疗疾病 2021/3/14 * 1、成功率低（活的克隆动物不到10%） 2、克隆动物存在健康问题（遗传和生理的缺陷-体型过大、发育困难） 3、克隆动物食品的安全性问题 (四)体细胞核移植技术存在的问题 2021/3/14 * 思考与探究 1.幼龄与老龄动物的组织细胞比较,分化程度低的与分化程度高的组织细胞比较,哪一种更易于培养?思考一下,这是什么道理? 幼龄动物细胞增殖能力强,有丝分裂旺盛,老龄动物则相反。所以,一般来说幼年动物的组织细胞比老年动物的组织细胞易于培养。同样,组织细胞的分化程度越低,则增殖能力越强,所以更容易培养。 2021/