生物化学_知识点二_DNA的逆转录合成_DNA的逆转录合成.ppt

项目一 DNA的生物合成 DNA 转录 RNA RNA(病毒) 反转录 二、反转录 概念 以RNA为模板，dNTP为原料，反转录酶催化，按碱基配对规律合成DNA的过程。 反转录酶，又称为依赖RNA的DNA聚合酶(RDDP) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . RDDP 引物, 4种dNTP RDDP RNase H 4种dNTP RDDP或DDDP 病毒RNA RNA-DNA 杂化分子 cDNA 前病毒 (双链DNA) 酶催化反应示意图 反向转录酶存在于所有致癌RNA病毒中, 其功能可能与病毒的恶性转化作用有关; 但它也存在于某些正常细胞中，在细胞分化与胚胎发生中可能起某些作用。 反转录病毒和反转录酶的发现, 提出了一个重要的医学问题──病毒致癌及癌基因 反转录的医学意义 癌基因(oncogene):能在体外引起细胞恶性转化,在体内诱发肿瘤的基因。 细胞癌基因(c-onc)或原癌基因(pro-onc): 存在于生物正常细胞基因组中的癌基因。正常情况下基因处于静止或低表达的状态。当受到致癌刺激被活化并发生异常时则可发生细胞癌变。 病毒癌基因(v-onc): 存在于致瘤病毒中的能使靶细胞发生恶性转化的基因。 是一种反转录病毒, 可引起获得性免疫缺陷综合征(AIDS,艾滋病)。 反转录酶在基因工程,分子病的基因治疗方面也有重要作用。 人类免疫缺陷病毒(HIV) 三、 DNA的损伤与修复 （一）DNA的损伤 生物体受某些理化和生物等外源性因素或机体内环境改变的影响，引起DNA分子结构的任何异常改变称为DNA损伤(DNA damage) 概念 O N H N O C H 3 R P O N H N O C H 3 R O N H N O C H 3 R P N H N O R O C H 3 UV （二）引起DNA损伤的因素 紫外线(常产生嘧啶二聚体) 电离辐射(断磷酸二酯键) 1、物理因素 胸腺嘧啶二聚体的产生 2、化学因素：均能干扰复制与转录功能 ▲烷化剂：(如氮芥类, CTX)，使鸟嘌呤的N7烷基化后脱落，成为无鸟嘌呤的位点 ▲亚硝酸盐：使碱基脱氨 原G-C配对最终变为A-T配对，导致错配 C→U A→I G→X C O HN C CH CH N O U C O N C CH CH N NH2 C A N NH2 N N N N O HN N N I N OH N N N H H2N G N OH N N N H HO X 目前多指病毒 糖苷键自行断裂；自发脱氨基作用, C?U，A?I。 生物因素 生理因素 机率极低 突变(mutation) ：有机体基因组可遗传的改变，即DNA序列的改变。 根据引发的原因，可将突变分为： 诱发突变和自发突变。 丝裂霉素：与DNA共价连接引起链交联 缺失 根据 DNA分子的改变，突变可分为4类： 点突变 颠换：异型碱基间变异 转换：同型碱基间变异 缺失或插入的碱基数不是3的整倍数时，则引起移码突变 插入 倒位(或易位)易位指染色体的一部分转移到同一条染色体的其 他部位或其他染色体上。倒位是在同一条染色体内部发生的易位。 基因突变可能出现的后果 生物体致死 生物体某些功能丧失 仅改变基因型，表现型不受影响 改变生物物种，出现新的生物特征 DNA复制过程所发生的突变(碱基配对错误)，由核内DNA聚合酶Ⅰ以其校读功能予以纠正。 若碱基错配频频发生或损伤范围大，则需采用以下修复方式进行修复。 （三）DNA损伤的修复 TT 光复活酶 （可见光） T + T DNA修复方式 1、光修复: 2、切除修复：由3种酶共同参与完成。 特异性核酸内切酶 DNA pol I DNA连接酶 5 5 3 3 5 5 3 3 5 5 3 3 5 5 3 3 5 3 3 5 5 3 3 5 5 3 3 5 5 3 3 5 5 3 3 5 5 3 3 5 5 3 3 5 复制 重组 DDDP I DNA连接酶 重组修复过程 3、重组修复：亦称复制后修复 4、SOS修复：DNA分子受到较大范围的损伤，细胞对危急状态所作出的反应。 机制 引起DNA较长期的、广泛的突变。 SOS调节网诱导产生的DNA聚合酶特异性低，识别碱基能力差, 使修复部位仍存在较多错配的碱基，但细胞能继续生存。 后果 项目一 DNA的生物合成