荧光免疫技术的应用.pptVIP

2021/3/17 * 二、荧光偏振免疫测定 利用荧光素经单一波长的偏振光照射后吸收光能,释放出相应的偏振荧光,荧光偏振程度与荧光分子大小成正比的关系而建立的免疫分析技术。 2021/3/17 * 2021/3/17 * 测定:药物、维生素和激素等 2021/3/17 * 三、荧光酶免疫测定 碱性磷酸酶标记抗体或抗原,固相载体包被抗原或抗体,酶分解4-MUP,脱磷酸根基团形成4-MU,360nm激发光照射,发出450nm荧光。 2021/3/17 * 酶和荧光底物 标记酶 底物 荧光产物 激发光(nm) 荧光(nm) 相应信号 碱性磷酸酶 4-MUP 4-MU 360 450 10 β-半乳糖苷酶 4-MUG 4-MU 360 450 10 辣根过氧化物酶 HPA 二聚体 317 414 0.03 2021/3/17 * 方法类型 双抗体夹心法 双抗原夹心法 固相抗原竞争法 2021/3/17 * 测定:抗病毒抗体、细菌和毒素抗原、激素、肿瘤标志物等 2021/3/17 * 非均相荧光免疫测定: 时间分辨荧光免疫测定 荧光酶免疫测定 均相荧光免疫测定: 荧光偏振免疫测定 2021/3/17 * 荧光免疫技术的优缺点 优点:特异性强、敏感