第1章-组织学绪论-张琳定稿.pptVIP

图13 超薄切片捞在铜网上，电子染色（醋酸铀、柠檬酸铅）后固定于电镜的标本支持架内 ↑ ↓ * ↓1 ↑2 14 电子显微镜 1 标本支持架插入部位 2 观察窗 * 图15 透射电镜图，浆细胞 * 图16 扫描电镜图，血细胞 * 组织化学术（histochemistry） 为应用化学、物理、生物化学、免疫学或分子生物学的原理和技术，与组织学技术结合而产生，在组织切片显示某种物质的存在和分布状态。 分类： 一般组织化学术 免疫组织化学术 原位杂交术 组织化学术 * 一般组织化学术： 组织中的某种结构成分与所加试剂发生化学反应 并呈现某种颜色，在显微镜下可观察到。 例：糖类—过碘酸-Schiff反应（PAS反应），检测组织或细胞中有无多糖存在的一种方法。原理：用过碘酸氧化多糖结构的碳键，使其形成2-醛基。醛基与无色的品红结合生成紫红色品红复合物，沉淀于细胞内糖原分布部位。 * 图17 PAS反应，小肠上皮杯状细胞的黏原颗粒 * 免疫组织化学（immunohistochemistry） 根据抗原、抗体特异性结合原理，检测组织切片中的肽和蛋白质。 用标记的抗体与组织中的抗原结合，标记物可于显微镜下观察。标记物有荧光素（荧光显微镜观察）、辣根过氧化物酶（光镜或电镜观察）、胶体金（多用于电镜观察）。 * 图18 免疫组织化学原理模式图 * 图19 免疫组织化学（荧光素标记） 毛细血管内皮细胞呈vWF阳性 * 图20 免疫组织化学（辣根过氧化物酶标记） 胰岛B细胞呈胰岛素阳性 * 图21 免疫组织化学电镜图示上皮细胞膜MAM－6蛋白 （A 胶体金标记 B 辣根过氧化物酶标记） * 原位杂交术（in situ hybridization） 即核酸分子杂交组织化学术，检测基因(DNA片段)的有无、基因的表达活性(mRNA) 原理：用带标记物的已知碱基顺序的核酸探针与细胞内待测核酸按碱基配对原则进行特异性原位结合（杂交），并通过对标记物的显示而获知待测核酸的有无及相对量。 常用标记物有放射性核素和地高辛。 * 图22 原位杂交 主动脉平滑肌细胞呈弹性蛋白mRNA阳性 * 图像分析术（image analysis） 又称形态计量术（morphometry）：应用数学和统计学原理对组织切片提供的平面图像进行分析，从而获得立体的组织细胞内有形成分的数量、体积、表面积等参数，从量的角度显示结构与功能的关系。 体视学（stereology）：根据连续的组织切片应用计算机进行三维重建，以获得微细结构的立体模型。 * 图23 计算机三维重建 示胰腺部分结构 动脉（红色）、静脉（蓝色） 导管（黄色）、胰岛（紫色） * 细胞培养术（cell culture） 把从机体取得的细胞在体外模拟体内的条件下进行培养；培养组织块或器官则称组织培养术或器官培养术。 用于研究细胞、组织的代谢、增殖、分化、形态和功能变化，各种理化因子对活细胞的影响。 培养条件：营养、生长因子、pH值、渗透压、O2和CO2浓度、温度，控制污染。 用相差显微镜观察。 * 图24 体外培养的HeLa细胞相差显微镜图 * 图25 体外培养的平滑肌细胞 （免疫组织化学染色显示肌动蛋白） * 组织工程（tissue engineering） 用细胞培养术在体外模拟构建机体组织或器官的技术。 正在构建的有皮肤、软骨、骨、肌腱、骨骼肌、血管、角膜等；其中以组织工程皮肤较为成功，已成为商品用于治疗烧伤、皮肤静脉性溃疡等疾病。 * 图26 实验中的组织工程耳 * 组织学与胚胎学的学习方法 审视角度 组织水平：层次顺序、特征性结构和细胞 细胞水平：主要细胞的分布、结构特点（含重要细胞的超微结构）及功能 形态和结构相统一 结构是功能的基础，功能是结构的必然表现 培养观察能力：重视实习课和图像观察 培养空间思维能力：将二维图形还原为三维构像 * 本章重点 掌握组织学、组织、嗜酸性、嗜碱性的概念 掌握HE染色法原理 了解石蜡切片术的基本方法 了解组织学学习方法要点 * 每位同学准备一本A4大小的绘图本（不要太厚，约20页即可）用于绘图，在封面分行写上：学号、姓名、年级、专业、实验室号。 每次实习课的课后必须完成一个主要结构的绘图；每次课绘图的内容会由上课老师布置给大家。 绘图原则上只能用红蓝铅笔，图中的主要结构需要用普通铅笔拉线后进行标注。图的下方注明：切片号、组织(或器官)名称、染色方法。 绘图在课后完成， 在下一次实习课事交给老师批改；最后一次绘图结束后，请自行把所有绘图依次扫描合并成一个PDF文件后提交给课代表，最后由课代表统一交给老师。 个人文件名的命名原则：学号、姓名、年级、专业（如*-林**-201