食品理化检验维生素的测定任务七维生素测定4.pptVIP

任务七 食品中维生素的测定 维生素C测定 操作： 空白滴定：取20ml空白液（加35 ml2%草酸，用1%草酸定容到50 ml）用2,6-二氯酚靛酚滴定。 标准液滴定，取标准Vc液20ml2~3份，置三角瓶中，用2 .6-二氯酚靛酚滴定。 样液滴定，取样液20ml各2份，置于三角瓶中，进行滴定。 2）2,4-二硝基苯肼法测定维生素C 原理： 总抗坏血酸包括还原型、脱氢型和二酮古乐糖酸。样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化为脱氢抗坏血酸，再与2，4-二硝基苯肼作用生成红色脎，脎的含量与总抗坏血酸含量成正比，进行比色测定。 本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定。主要操作： （1）样品处理： （2）氧化处理： （3）呈色反应： （4）比色测定： 维生素C 测定（2，4 - 二硝基苯肼比色法 （2）试剂 4.5mol/L硫酸;85%硫酸; 2，4 - 二硝基苯肼溶液（20g/L); 草酸溶液（20%）;草酸溶液（10%）;硫脲溶液（20%）硫脲溶液（10%）; 1mol/L盐酸： 抗坏血酸标准溶液(1mg/ml);活性炭 (3)仪器 仪器 恒温箱：37± 5℃ 。 可见 - 紫外分光光度计。 捣碎机 分析步骤 （4）试样的制备 全部实验过程应避光。 鲜样的制备：称取 100 鲜样及吸取 100ml20g/L草酸溶液，倒入捣碎机中打成 匀浆，取 10-40g匀浆（含 1-2mg抗坏血酸）倒入 100ml 容量瓶中，用 10% 草酸溶液稀释至刻度，混匀。 分析步骤 取 10-40g匀浆 倒入 100ml 容量瓶中，用 10% 草酸溶液稀释至刻度，混匀。 样品制备 干样制备：称 1-4g干样（含 1-2mg抗坏血酸）放入乳钵内，加入 10g/L 草酸溶液磨成匀浆，倒入100ml容量瓶内，用 10g/L草酸溶液稀释至刻度，混匀。 称 1-4g干样 放入乳钵内，加入 10g/L 草酸溶液磨成匀浆， 分析步骤 混匀。 倒入 100ml 容量瓶中用 10% 草酸溶液稀释至刻度， 样液制备 将 上述样液过滤，滤液备用。不易过滤的试样可用离心机离心后，倾出上清液，过滤，备用。 Company Logo 氧化处理 取 25ml 上述滤液，加入 2g活性炭，振摇 1min，过滤，弃去最初数毫升滤液。取 10ml 此氧化提取液， 10ml(20g/L%) 硫脲溶液，混匀，此试样为稀释液。 呈色反应 于三个试管中各加入 4ml 稀释液。一个试管作为空白，在其余试管中加入 1.0ml20g/L2,4-二硝基苯肼溶液，将所有试管放入 37 ± 5℃恒温箱或水浴中，保温 3h。 3 h后取出，除空白管外，将所有试管放入冰水中。空白管取出后使其冷到室温，然后加入加入 1.0ml20g/L2,4-二硝基苯肼溶液，在室温中放置 10-15min后放入冰水内。其余步骤同试样。 85%硫酸处理 当试管放入冰水后，向每一试管中加入 5ml85%硫酸，滴加时间至少1min，需边 加边摇动试管。将试管自冰水中取出，在室温放置 30min后比色。 比色 用 1cm比色杯，以空白液调零点，于 500nm 波长测吸光值。 标准曲线的绘制 加 2g活性炭于 50ml 标准溶液中，振动 1min，过滤。取 10min滤液放入 500ml容量瓶中，5.0g硫脲，用 10g/L 草酸溶液稀释至刻 度，抗坏血酸浓度 20ug/ml)’。 取 5，10，20，25，40,50,60ml稀释液，分别放入 7 个 100ml容量瓶中，用 10g/L) ’ 硫脲溶液稀释至刻度，使最后稀释液中抗坏血酸的浓度分别为 1，2，4，5，8，10,12ug/ml ,按试样测定步骤形成脎并比色。 以吸光值为纵坐标，抗坏血酸浓度（ ug/ml ）为横坐标绘制标准曲线。