第七章蛋白质分分离纯化和表征.pptVIP

第七章 蛋白质的分离纯化和表征;一、蛋白质的酸碱性质;等电点（pI）: 在特定pH条件下，某种蛋白质分子所带正负电荷相等，静电荷为零，这一pH 称为该蛋白质的等电点（pI）。; 等电pH并不是一个恒定的值，它会因溶液中盐的种类和离子强度的影响而有所不同。 等离子点(isoionic piont): 蛋白质在纯水溶液中的带电状态则没有其他离子干扰，完全由H+的解离和结合来决定，这种条件下的等电点称为等离子点。等离子点是蛋白质的特征性常数。 ;二、蛋白质的分子大小与分子量的测定;（一）根据化学组成测定最低相对分子量 用化学分析方法测出蛋白质中某一微量元素的含量。并假设蛋白质分子中含有一个被测元素的原子，则可由此计算出蛋白质的最低分子量。 例：肌红蛋白和血红蛋白含铁量均为0.335%,计 算二者的相对分子质量。 最低相对分子量＝ x 100 =;（二）渗透压法测定相对分子量;（三）沉降分析测定Mr; 将纯的分析样品放于离心池中，进行 低速度长时间 离心，样品颗粒沉降形成浓度差， 而扩散又使样品 颗粒由高浓度区向低浓度区扩散, 最终达到沉降与扩 散的平衡状态。;（四）凝胶过滤法测定Mr;（五）SDS法测定Mr;聚丙烯酰胺凝