第二章蛋白质定性定量分析课件.pptVIP

第二章 蛋白质的定性定量分析; 蛋白质定性分析 (qualitative analysis); 蛋白质含量的测定方法（重点掌握）;第一章 蛋白质的含量测定; 蛋白质元素组成的特点;一、紫外光谱 (A280)吸收法;原 理;所需时间;计算方法;二、Bradford检测法;原 理;所需时间;计算方法;三、Lowry检测法;原 理;所需时间;计算方法;四、BCA (二喹啉甲酸)检测法;原 理 ;优 点;计算方法;小结（Summary）;其它蛋白质的定性定量方法;第二节 蛋白质相对分子量测定;一、SDS测定蛋白质的相对分子量;3. SDS基本原理; SDS作用???与蛋白牢固结合，当其浓度大于1 mmol/L 时，SDS与蛋白质的结合比例为 1.4g SDS/1g蛋白质，由于十二烷基硫酸根带负电荷，使得样品中各种蛋白质与SDS形成的SDS-蛋白质复合物都带有相同密度的负电荷，掩盖了蛋白质分子间天然的电荷差异; SDS-蛋白质复合物分子构型也几乎相同(雪茄烟形的长椭圆棒状的复合物)，而且具有相同的荷质比，因此在SDS中，SDS-蛋白质复合物的电泳迁移率只与其分子量有关，而不再受所带电荷及分子形状的影响，且在一定条件下，迁移率与分子量呈对数线性关系 ;4. SDS测定分子量的操作;;5. 注意事项; 多亚基蛋白质分