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①改变发酵液的物理性质,提高固液分离效率;
②尽可能使产物转入便于后处理的某一相中(多为液相);
③去除发酵液中部分杂质,以利于提取和精制后续各工序的顺利进行。 ;2.1 发酵液的预处理和固液分离;;预处理和固液分离内容;生物产品的分类(根据分离特点);精制产品分离纯化一般流程;胞内产品;2.1 发酵液预处理;预处理的方法;2.1.2发酵液过滤性能的改变;① 发酵产物浓度较低,而且悬浮液中大部分是水;
② 悬浮物颗粒小,相对密度与液相相差不大;
③ 固体粒子可压缩性大;
④ 液相粘度大,大多为非牛顿型流体;
⑤ 性质不稳定,随时间变化。;一、降低液体粘度;加水稀释法 ;加热法 ;加热法注意事项:;二、调整pH;氨基酸、蛋白质等两性物质,在其等电点处的溶解度最小,此即为等电点沉淀法。;在膜过滤中,发酵液中的大分子物质易与膜发生吸附,通过调整pH值改变易吸附分子的电荷性质,即可减少堵塞和污染。
细胞、细胞碎片及某些胶体物质等在某个pH值下也可能趋于絮凝而成为较大颗粒,有利于过滤的进行。 ;三、凝聚与絮凝;1.凝聚 ;;在生理pH值下,发酵液中的菌体或蛋白质常常带有负电荷,由于静电引力的作用,使溶液中带相反电荷的阳离子被吸附在其周围,在界面上形成双电层。
但是,这些正离子还具有因热运动而离开胶粒表面的趋势。;在相距胶核表面约一个离子半径Stern平面以内,正离子被紧密束缚在胶核表面,称为吸附层;
在Stern平面以外,剩余的正离子在溶液中扩散开去,距离越远,浓度越小,最后达到主体溶液的平均浓度,称为扩散层。;;? 带有相同电荷和扩散双电层的结构。ξ电位越大,电排斥作用就越强,胶粒的分散程度也越大,发酵液过滤就越困难。 ;如果在发酵液中加入具有相反电性的电解质,就可以中和胶粒的电性,使ξ电位降低,胶体体系变得不稳定。
当双电层的排斥力不足以抗衡胶粒间的范德华引力时,由于热运动的结果就导致胶粒的互相碰撞而聚集。
另外,由于电解质离子在水中的水化作用会破坏胶粒周围的水化层,使胶粒可以直接碰撞而聚集。;;
(2-2)
N:阿伏伽德罗常数,mol-1;
e:电??电荷,库仑;
k:波尔兹曼常数,J·K-1;
T:热力学温度,K;
ci:i离子摩尔浓度,mol/L;
Zi:i离子的化合价。;从上两式可知,ξ电位与溶液中带相反电荷的离子强度有关,因此,提高离子的化合价和浓度可以压缩扩散双电层,使其厚度减小,从而使ξ电位降低。;电解质的凝聚能力可用凝聚值来表示,使胶粒发生凝聚作用的最小电解质浓度(mol/L)称为凝聚值。;阳离子对带负电荷的发酵液胶体粒子凝聚能力的次序为:Al3+ Fe3+ H+ Ca2+ Mg2+ K+ Na+ Li+。;2.絮凝;絮凝剂是一种能溶于水的高分子聚合物,其相对分子质量可高达数万至一千万以上,它们具有长链状结构,其链节上含有许多活性功能团,包括带电荷的阴离子(如-COOH)或阳离子(如-NH2)基团以及不带电荷的非离子型基团。
它们通过静电引力、范德华力或氢键的作用,强烈地吸附在胶粒的表面。当一个高分子聚合物的许多链节分别吸附在不同的胶粒表面上,产生桥架联接时,就形成了较大的絮团,这就是絮凝作用。;对絮凝剂的化学结构一般有下列要求:
分子必须含有相当多的活性官能团,使之能和胶粒表面相结合;
必须具有长链的线性结构,以便同时与多个胶粒吸附形成较大的絮团,但絮凝剂的相对分子量不能超过一定限度,以使其具有良好的溶解性。 ; 根据其活性基团在水中解离情况的不同,絮凝剂可分为:
非离子型
阴离子型
阳离子型 ;根据其来源的不同又可分为如下三类:
(1) 有机高分子聚合物,如聚丙烯酰胺类衍生物、聚苯乙烯类衍生物。
(2) 无机高分子聚合物,如聚合铝盐、聚合铁盐等。
(3) 天然有机高分子絮凝剂,如聚糖类胶粘物、海藻酸钠、明胶、骨胶、壳多糖、脱乙酰壳多糖等。 ;应用现状:;影响因素:;3.混凝;对于非离子型和阴离子型高分子絮凝剂,则可以与无机电解质凝聚剂搭配使用。
首先加入电解质,使悬浮粒子间的双电层电位降低、脱稳,凝聚成微粒,然后再加入絮凝剂絮凝成较大的颗粒。无机电解质的凝聚作用为高分子絮凝剂的架桥创造了良好的条件,从而大大提高了絮凝的效果。;四、加入惰性助滤剂;硅藻土、纤维素、石棉粉、珍珠岩、白土、炭粒、淀粉;五、加入反应剂;加入反应剂,可以和某些可溶性盐类发生反应生成不溶性沉淀,如CaSO4、AlPO4等。
生成的沉淀能防止菌丝体粘结,使菌丝具有块状结构,沉淀本身可作为助滤剂,并且能使胶状物和悬浮物凝固,从而改善过滤性能。
正确选择反应剂和反应条件,能使过滤速率提高3~10倍。;应用实例:;如果发酵液中含有不溶性多糖物质,则最好用酶将它转化为
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