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1;2;;理论基础;5;6;7;;9;10;11;12;13;14;Breslow等人设计了2种核糖核酸酶模型:A、B,A催化只生成III,B催化只生成II。
CD底物复合物的几何形状和催化基团所处的位置对选择性起了决定性作用。最佳pH6:一个咪唑基以碱的形式,另一个咪唑基以质子化形式参加反应,与天然酶相似。
;16;;18;19;20;21;;23;24;25;26;27;28;29;30;抗体;酶是生物催化剂;对任何化学反应,反应物在变为产物之前,必须获得一定的能量,成为活化态或称过渡态。过渡态处于最高能阶上。
过渡态与反应物的能阶之差称为活化能。
获得活化能的多少与反应的速度成正比。;过渡态理论认为,酶与底物的结合经历了一个易于形成产物的过渡态,实际上是降低了反应所需的活化能。;与反应过渡状态结合作用;抗体与酶;1969年Jencks根据抗体结合抗原的高度特异性,与天然酶结合底物的高度专一性相类似的特性,在过渡态理论的基础上首先提出设想:
能与化学反应中过渡态结合的抗体,可能具有酶的活性,催化反应的进行。
1986年Lerner和Schultz证实了这一设想。;抗体酶的发现;1986年Schultz以对硝基苯酚磷酸胆碱酯(PNPPC)作为相应的羧酸二酯的过渡态类似物。
诱导产生的抗体酶使水解反应速度加快12000倍。;;过渡态理论与抗体酶;抗体酶具有典型的酶反应特性;抗体酶的特性;抗体酶的催化反应类型;抗体酶的制备;诱导法;拷贝法;引入法;抗体酶和酶一样也可以用化学修饰法加以改造。
对抗体酶进行结构修饰的关键是找到一种温和的方法在抗体结合位置或附近引入具有催化功能的基因。
游离巯基就是适合的基团之一,它具有高亲核性,易于氧化,能通过二硫化物进行交换反应或亲电反应而选择性修饰的特点。;稳定过渡态法制备抗体酶;如:Napper用环化的磷酸酯作为过渡态类似物,动物免疫获得单克隆抗体24B11,该抗体酶可催化外消旋的羟基羧酸酯分子内环化形成内酯,加速反应167倍,同时表现出很高的对映体和立体选择性。用于手性拆分的应用;抗体与半抗原互补法;抗体酶的应用前景;抗体酶用于肿瘤治疗;静脉给药后,当药物扩散至肿瘤细胞的表面或附近,抗体酶就会将前药迅速水解释放出抗肿瘤药物,从而提高肿瘤细胞局部药物浓度,增强对肿瘤的杀伤力,达到提高肿瘤化疗效果的目的。
当然前药只能被抗体酶水解而不能被内源性酶水解,抗原还要尽量减少免疫原性 。;抗体酶的研究,为人们提供了一条合理途径去设计适合于市场需要的蛋白质,即人为地设计制作酶。它是酶工程的一个全新领域。
构建有别于天然功能酶的新酶类,是酶工程研究的又一前沿领地。 ;59;分子印迹聚合物的制备方法;印迹分子与聚合单体的结合;可逆共价结合法;非共价结合;印迹技术的特点;65;66;67;如:用酒石酸作用于牛血清白蛋白,冷冻干燥,再用溶剂抽提酒石酸,得到酒石酸印迹的BSA。印迹白蛋白在无水乙酸乙酯溶剂中结合酒石酸的量比未印迹的白蛋白高30倍.;生物印迹制备半合成酶;70;71;72;73;74;75;抗体酶的应用前景;抗体酶的研究,为人们提供了一条合理途径去设计适合于市场需要的蛋白质,即人为地设计制作酶。它是酶工程的一个全新领域。
构建有别于天然功能酶的新酶类,是酶工程研究的又一前沿领地。 ;可逆共价结合法;79
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