外泌体的分离鉴定.docxVIP

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  • 2021-03-27 发布于天津
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外泌体的分离鉴定 [ 摘 要] 外泌体,细胞间物质信息的传递者, 在细胞生物 学以及分子生物学领域中, 扮演着越来越重要的角色。 然而目前 对于外泌体的分离鉴定还存在一定的困难, 因此本文对外泌体的 分离鉴定方法进行综述, 为外泌体的进一步研究提供更有效的方 法。 近年来,越来越多的证据表明外泌体对于细胞生物学以及医 学研究方面具有重要的价值, 而由于外泌体的体积结构方面的因 素,其分离纯化还存在很大的困难, 目前比较常用的分离方法有 差速离心法、密度梯度离心法、超滤离心法、免疫磁珠法、多聚 物沉降法等。 1. 差速离心法 陈绍倩[1]等人以白血病细胞系 K562细胞为材料,采用多步 离心的方法成功地提取到了的外泌体。 此种实验方法操作不是很 复杂,实验设备要求相对简单, 拥有超速离心机和细胞培养设备 即可,是一种比较简便的提取外泌体的方法, 基本可以满足实验 研究的要求。 但分离纯度不是很高, 并且经过多次离心对外泌体 的理化性质造成一定的影响。 2. 密度梯度离心法 像所有的脂质小囊泡一样, 外泌体悬浮于特定密度梯度的 蔗糖中,其密度范围从 1.13g/ml 到 1.210g/ml ,将细胞混悬液 或匀浆置于蔗糖介质的顶部, 通过重力或离心力场的作用使细胞 分层、分离,从而将外泌体从混杂的物质如蛋白聚集物或细胞凋 亡的核小体碎片等中分离出来 [2] 。崔焱 [3] 等人根据其

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