基于纳米簇电化学发光生物胺传感器的构建与应用.docxVIP

摘要 PAGE VII Construction and Application of Electroluminescent Biogenic amine sensors Based on Nanoclusters 摘要 电化学发光（Electrogenerated chemilumines-cence，ECL）作为一种新型的电化学技术，被广泛应用于生物检测，具有灵敏度高、线性范围广、成本低、可控性好、样品预处理简单、检测快速等特点。目前，在ECL中使用了不同的量子点作为发射体，而这些量子点由于其结构中存在诸如Cd2+和Pb2+等重金属的固有毒性，导致生物测定的应用受到限制。而且许多传统的有机发光剂价格昂贵，毒性大。因此，为了减少环境污染和经济损耗，开发一种新的低毒或无毒的ECL生物分析材料极为必要。 目前，贵金属纳米团簇（Noble metal clusters，MNCs；尺寸小于2 nm）由于其独特的导电性和优异的生物相容性，在荧光生物标记、化学传感和生物传感器检测和实际应用中受到了广泛的关注。由于特殊的物理（光学、电子）、化学性质，金纳米团簇（Au NCs）和银纳米团簇（Ag NCs）被用作化学传感和生物成像的电化学发光标签。因此，基于贵金属纳米材料的电化学传感器研究及生物分析应用具有极大的研究价值及应用前景。由于生物分子保护的金纳米簇具有更好的生物相容性，本文报道了一种新型的基于Au@Ag纳米团簇的精胺(SPM)固态ECL传感器。以L-谷胱甘肽(L-GSH)为模板，通过两步合成高水溶性的金@银纳米团簇(Au@Ag NCs)，本研究发现该金@银纳米团簇(Au@Ag NCs)具有较强的阴极与阳极电化学发光信号，特别是SPM能够有效地抑制Au@Ag NCs的阴极ECL强度却又能增强Au@Ag NCs的阳极ECL强度，本研究并对其抑制或增强ECL的机理进行了研究，提出了SPM作为共反应促进剂的ECL机制。为了构建固态ECL平台，在玻碳电极表面对Au@Ag NCs、PANI、ATMP进行了良好的修饰，并利用PANI的优良导电性促进了它们之间的电子转移。通过优化一些重要的实验条件，构建了用于测定SPM的ECL传感器，其阳极与的阴极的线性范围分别为1×10-12-1×10-5 M和1×10-12-1×10-4 M，最低检出限分别为1.10×10-13 M (S/N=3) 和2.97×10-13 M (S/N=3)，其稳定性良好。本论文的具体研究内容如下： 设计了一种基于GSH-Au@Ag NCs的液相电化学发光（ECL）生物传感器，用于精胺的便捷检测分析。本研究以谷胱甘肽作为模板保护剂，首次制备了具红色荧光的高水溶性金银合金纳米簇，发现其能够在K2S2O8体系中产生阴极电化学发光，也能够在TEA体系中产生阳极电化学发光，而且生物分子——精胺能够抑制GSH-Au@Ag NCs在阴极和阳极的电化学发光。基于此现象，首次构建了一种简便的GSH-Au@Ag NCs液相电化学发光生物识别系统，这种发光体系在均相溶液中进行，无需电极修饰。因此，构建了这一简单而方便的电化学发光方法被用于精胺的检测分析，在阳极检测中精胺浓度在2×10-5-17.8×10-5 M和17.8×10-5-2×10-3 M之间具有良好的线性关系，检测限为1.32×10-6 M；在阴极检测中精胺浓度在1×10-5-50×10-5 M和50×10-5-4×10-3 M之间具有良好的线性关系，检测限为1.95×10-6M。并且具有良好的稳定性，可操作性和实用性，显示出广泛的实际应用潜力。基于以上结果，本研究设计了一种新型ATMP诱导三维导电聚合物水凝胶支架的固态电化学发光生物传感器。用苯胺（Ani）、谷胱甘肽保护的金银二元合金簇（GSH-Au@Ag NCs）和氨基三亚甲基膦酸(ATMP)对GCE电极进行修饰，以GSH-Au@Ag NCs信号探针，构建了一种基于聚苯胺（PANI）水凝胶的固态电化学发光（ECL）生物检测系统。发现该GSH-Au@Ag NCs作为发光体既能够在K2S2O8体系中产生阴极电化学发光，又能够在TEA体系中产生阳极电化学发光，而且生物分子——精胺能够抑制其阴极电化学发光，却又增强其阳极的电化学发光。基于此现象，构建了一种新型的基于Au@Ag NCs和K2S2O8体系/TEA体系的精胺(SPM)固态ECL传感器。阴极与阳极的检测范围分别为1×10-12-1×10-4 M和1×10-12-1×10-5 M，相应的检测限分别为2.97×10-13 M、1.10×10-13 M。实验结果证明该ECL传感器具有较宽的线性范围和较低的SPM检测限。因此，基于Au@Ag NCs的生物胺ECL传感器在生物应用方面具有很大的潜力。综上，本研究有助于为生物化学与纳米分析