实验二粗蛋白的测定.docx

实验二 饲料粗蛋白的测定 一、实验目的 通过饲料样品中粗蛋白质的测定， 让学生了解了解凯氏定氮法测定的基本原理， 掌握半 微量凯氏定氮法测定饲料粗蛋白质的方法，掌握粗蛋白质含量的计算方法。 二、实验原理 各种饲料的有机物质在还原性催化剂 （如CUSO4, K2SO4或Na2SO4或Se粉）的帮助下， 用浓硫酸进行消化作用， 使蛋白质和其它有机态氮 （在一定处理下也包括硝酸态氨） 都转变 成NH4+并与H2SO4化合成（NH4）2SO4，而非含氮物质，则以 CO 2 T, H2OT, SO 2T状 态逸出。 消化液在浓碱的作用下进行蒸馏， 释放出的铵态氮， 用硼酸溶液吸收之并与之结合 成为四硼酸铵，然后以甲基红溴甲酚绿作指示剂，用 HCl 标准溶液（ 0.1mol/L ）滴定，求 出氮的含量，根据不同的饲料再乘以一定的系数（通常用 6.25 系数计算） ，即为粗蛋白质的 含量。 其主要化学反应如下： 1、 2NH （CH） 2COOH+13SQt（ NH） 2SQ+6CQ+I2SO+I6H2 （丙氨酸） 2、 （ NH） 2SO +2NaOHR2NH 3+3HO+2NaSQ 3、 4fBO+ NH 3~ NHHBO+5HO 4、 NHHBO7+HCI+5H2S NHC1+4HBO 本法不能区别蛋白氮和非蛋白氮， 只能部分回收硝酸盐和亚硝酸盐等含氮化合物。 在测 定结果中除蛋白质外，还