橡胶籽β-葡萄糖苷酶水解苦丁茶叶中黄酮糖苷的工艺探究材料资料.docVIP

橡胶籽β-葡萄糖苷酶水解苦丁茶叶中黄酮糖苷的工艺探究摘 要 苦丁茶中含有丰富的黄酮类物质，具有重要的生理活性，而这些生理功能主要由苷元来发挥，而苷元含量占比很小，所以造成了黄酮资源的浪费。因此需要探究一种方法将苦丁茶中的黄酮糖苷转化为黄酮苷元。本课题研究了三种市面常见的冬青科苦丁茶苦丁茶冬青、大叶冬青和枸骨中黄酮的最佳提取工艺，橡胶籽β-葡萄糖苷酶对三种苦丁茶黄酮提取液中黄酮糖苷的最佳水解工艺，水解前后三种苦丁茶黄酮提取液清除自由基和抑菌能力。 三种苦丁茶中黄酮含量差异较大，其中苦丁茶冬青中含量最高，响应面优化最佳提取工艺为：提取时间为2h、料液比52mL/g 、乙醇浓度为61%，其总黄酮得率为2.18%；大叶冬青次之，响应面优化最佳提取工艺为：提取时间为2h、料液比54mL/g 、乙醇浓度为64%，其总黄酮得率为1.86%；枸骨中黄酮含量最少，响应面优化最佳提取工艺为：提取时间为1h、料液比60mL/g 、乙醇浓度为60%，其总黄酮得率为0.208%。 橡胶籽β-葡萄糖苷酶酶解苦丁茶冬青黄酮提取液的最佳条件为：加酶量为 4U/mL，酶解时间为6h，酶解温度为45℃。酶解后，槲皮素含量由0.52ug/mL提升到1.39ug/mL，山奈酚含量由2.01ug/mL提升到2.06ug/mL，异鼠李素含量由0.98ug/mL提升到1.43ug/mL；橡胶籽β-葡萄糖苷酶酶解大叶冬青黄酮提取液的最佳条件为：加酶量为 4U/mL，酶解时间为5h，酶解温度为45℃。酶解后，槲皮素含量由1.02ug/mL提升到1.47ug/mL，山奈酚含量由1.79ug/mL提升到2.52ug/mL，异鼠李素含量由0.72ug/mL提升到1.21ug/mL；橡胶籽β-葡萄糖苷酶酶解枸骨黄酮提取液的最佳条件为：加酶量为 5U/mL ，酶解时间为7h，酶解温度为45℃。酶解后，槲皮素含量由0.35ug/mL提升到0.63ug/mL，山奈酚含量由0.55ug/mL提升到0.81ug/mL，异鼠李素含量由0.76ug/mL提升到1.16ug/mL。 三种苦丁茶黄酮提取液的酶解液对DPPH自由基、羟基自由基和ABTS自由基的清除能力均强于非酶解液。且在1~15ug/mL的浓度范围内，苦丁茶冬青及大叶冬青的黄酮提取液及其酶解液对三种自由基的清除能力随着浓度的提升而逐渐增大。且当浓度大于4ug/mL时，两者对DPPH自由基的清除能力强于同浓度下的Vc溶液。枸骨黄酮提取液及其酶解液在1~9ug/mL的浓度范围内，其清除自由基的能力与浓度成正相关。当浓度大于6ug/mL时，其酶解液与非酶解液对DPPH自由基的清除能力强于同浓度下的Vc溶液。苦丁茶冬青和大叶冬青的黄酮提取液及其酶解液均对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、黑曲霉、金黄色葡萄球菌具有抑制作用，且酶解液抑制能力强于非酶解液。枸骨的黄酮提取液及其酶解液黄酮浓度过低，在低浓度条件下对致病菌的无抑菌能力。 关键词：苦丁茶；橡胶籽；β-葡萄糖苷酶；黄酮；水解 Abstract Kudingcha is rich in flavonoids and has important physiological activities. These physiological functions are mainly exerted by aglycones, and the content of aglycones is very small, thus causing a waste of flavonoid resources. Therefore, we need to explore a method to convert flavonoid glycosides in kudingcha to flavonoid aglycones. In this study, the optimal extraction technology of flavonoids from kudingcha kudingcha holly, large leaf holly, and citrus bone in three kinds of common holly family kudingcha kudingcha, holly leaf holly and holly bone was studied. The best hydrolysis technology of flavonoid glycosides, three kinds of kudingcha flavonoid extracts before and after hydrolysis to scavenge free radicals and antibacterial