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- 2021-04-05 发布于北京
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检验仪器分析技术
沧州医学高等专科学校 王凤玲
临床分子生物学检验仪器
蛋白质测序仪
蛋白质测序仪的使用、维护及常见故障处理
一、蛋白质自动测序仪工作流程
蛋白质测序仪的使用、维护及常见故障处理
二、蛋白质自动测序仪的维护
流动相的选择
采用与检测器相匹配且粘度小的“HPLC”级溶剂,经过蒸馏和0.45u的过滤去除纤维毛和未溶解的机械颗粒等,经过0.2u的过滤可除去有紫外吸收的杂质对试样有适宜的溶解度
水的等级
需用纯化水,装水的溶剂瓶要经常更换,连续几天不使用仪器时,要将管路用甲醇清洗
脱气
除去流动相中溶解或因混合而产生的气泡成为脱气。脱气可防止由气泡产生而引起的故障;可防止由溶解气体量的变动引起的检测不稳定度
分析柱
在使用新柱或长时间未用的分析柱之前,最好用强溶剂在低流量下(0.2~0.3ml/min)冲洗30分钟;定期使用强溶剂冲洗柱子;使用缓冲盐后,先用水冲洗4小时左右,再换有机溶剂(如甲醇)冲洗色谱柱和管路;净化样品;分离条件合适;不使用时盖上盖子,避免固定相干枯;使用预柱;避免流动相组成及极性的剧烈变化;避免压力脉冲的剧烈变化。
灯管
氘灯不能够频繁开启,否则容易损坏
蛋白质测序仪的使用、维护及常见故障处理
三、蛋白质自动测序仪的常规故障及其处理
蛋白质自动测序仪的常见故障及其处理办法
故障现象
故障原因
处理办法
管路中不断有气泡生成
吸滤头堵塞
用5%-20%的稀硝酸超声波清洗,再用蒸馏水清洗
泵无法洗液或排液,流路不通
宝石球粘附于垫片
用针筒抽出口单向阀以产生负压,使宝石球与垫片分开
拆下单向阀,放入异丙醇或水中,用超声波清洗
系统压力波动大
宝石球或塑料片受污导致密封不好
拆下单向阀,放入异丙醇或水中,用超声波清洗
系统压力波动大或漏液
密封圈磨损而导致密封不良
更换密封圈
蛋白质测序仪的使用、维护及常见故障处理
三、蛋白质自动测序仪的常规故障及其处理
蛋白质自动测序仪的常见故障及其处理办法
故障现象
故障原因
处理办法
系统压力波动大或压力偏高
线路过滤器堵塞
5%稀硝酸超声波清洗
漏液
手动进样阀转子密封损坏
更换转子密封
载样困难
定量环堵塞或进样器污染
清洗或更换定量环、进样器
系统高压、峰型变差、保留时间变化
液相柱污染
正相柱用正庚烷、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、乙醇清洗;反相柱用甲醇、乙腈、氯仿、异丙醇、0.05M稀硫酸清洗
样品池和参比池能量相差较大
检测器样品池污染
用针筒注入异丙醇清洗样品池,如污染严重,拆开样品池,将透镜等放入异丙醇中超声波清洗
蛋白质测序仪的使用、维护及常见故障处理
四、蛋白质自动测序仪的主要应用
1. 未知蛋白质的鉴定
2. 基因工程研究
3. 蛋白质或肽类纯度的鉴定
4. 蛋白质功能、蛋白质组学研究
5. 核酸研究
6. 其他
蛋白质测序仪的使用、维护及常见故障处理
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